آکریدین اورنج سیگما کد A6014 | رنگ Acridine Orange اصل
آکریدین اورنج (Acridine Orange hemi(zinc chloride) salt) با کد محصول A6014 از تولیدات معتبر سیگما-آلدریچ، یک رنگ فلورسنت کاتیونی، نفوذپذیر به سلول و متاسینیک است که برای تمایز و پایش تفکیکی اسیدهای نوکلئیک (DNA و RNA) و ساختارهای وزیکولی اسیدی (AVOs) به کار می‌رود. این رنگ زمانی که به صورت اینترکالیت به DNA دورشته‌ای متصل شود دارای طول‌موج نشری سبز (حوالی ۵۲۵ نانومتر) است، اما هنگام تجمع و برهم‌کنش الکترواستاتیک با RNA تک‌رشته‌ای یا در محیط‌های اسیدی درون اندولیزوزوم‌ها و اتوفاگوزوم‌ها به دلیل دایمریزاسیون، تغییر طیف داده و فلورسانس قرمز/نارنجی (۶۵۰ نانومتر) ساطع می‌کند. این خاصیت منحصر‌به‌فرد، آن را به ابزاری عالی در میکروسکوپ فلورسانس و فلوسایتومتری مبدل کرده است.
کاربردها
| عنوان کاربرد | توضیح |
|---|---|
| سنجش تشکیل وزیکول‌های اسیدی در اتوفاژی | رنگ‌آمیزی کمی و کیفی اتولیزوزوم‌ها و وزیکول‌های وزیکولار اسیدی (AVO) با سیگنال فلورسانس قرمز در فلوسایتومتری |
| تمایز هم‌زمان DNA از RNA | رنگ‌آمیزی افتراقی هسته (فلورسانس سبز برای DNA) در برابر نوکلئولوس و سیتوپلاسم (فلورسانس قرمز/نارنجی برای RNA) |
| ارزیابی زیست‌پذیری و سلامت اسپرم | بررسی پایداری کروماتین و آسیب‌های ساختاری در رشته‌های DNA اسپرم در ارزیابی‌های باروری |
| تشخیص انگل‌های خونی و مالاریا | شناسایی سریع و حساس تک‌یاخته‌های پلاسمودیوم در گسترش‌های خونی با میکروسکوپ فلورسانس |
ویژگی‌ها و مشخصات
| ویژگی | مقدار |
|---|---|
| نام محصول | Acridine Orange hemi(zinc chloride) salt |
| برند سازنده | سیگما-آلدریچ (Sigma-Aldrich) |
| کد کاتالوگ | A6014 |
| شماره ثبت CAS | 10127-02-3 |
| فرمول مولکولی | C17H19N3 · 0.5ZnCl2 |
| وزن مولکولی | 369.96 g/mol |
| طول موج تهییج و نشر (Excitation/Emission) | تحریک در ۵۰۰ نانومتر / نشر سبز در ۵۲۵ نانومتر (اتصال به dsDNA) و نشر قرمز در ۶۵۰ نانومتر (اتصال به ssRNA/اسیدی) |
| شکل ظاهری | پودر کریستالی نارنجی پررنگ تا قهوه‌ای |
| حلالیت | محلول در آب مقطر (تا حدود ۲۵ میلی‌گرم در میلی‌لیتر) و محلول در اتانول |
| شرایط نگهداری | دمای اتاق (۱۵ تا ۲۵ درجه سانتی‌گراد)، نگهداری در محیط خشک و بدون نور |
مزایا
| عنوان مزیت | توضیح |
|---|---|
| نفوذپذیری کامل و سریع به سلول‌های زنده | رنگ‌آمیزی بدون نیاز به مراحل تثبیت فیزیکی غشا (Fixation) و مناسب برای تصویربرداری زنده (Live Imaging) |
| خاصیت فلورسانس دوگانه و افتراقی | امکان ثبت هم‌زمان دو کانال فلورسنت با تحریک توسط یک منبع نوری آبی مشترک |
| حساسیت بالا در سنجش اتوفاژی با فلوسایتومتری | تعیین دقیق درصد سلول‌های دارای واکوئول‌های اسیدی با فلورسانس کانال FL3 |
| انحلال عالی در بافرهای فیزیولوژیک | آماده‌سازی فوق‌العاده آسان محلول‌های کاری در بافر فسفات سالین (PBS) |
سوالات متداول
غلظت کاری مناسب آکریدین اورنج برای ردیابی اتوفاژی چقدر است؟
غلظت کاری معمول بین ۱ تا ۵ میکروگرم در میلی‌لیتر در بافر PBS یا محیط کشت بدون سرم به مدت ۱۵ دقیقه در دمای ۳۷ درجه سانتی‌گراد است.
چرا پس از مدتی زیر نور میکروسکوپ رنگ فلورسانس آکریدین اورنج تغییر می‌کند؟
این رنگ به تابش طولانی‌مدت پرتو نوری حساس است و فوتوبلیچینگ یا آسیب اکسیداتیو می‌تواند رنگ‌آمیزی قرمز را به سبز مبدل کند؛ لذا تصویربرداری باید به‌سرعت انجام شود.
آیا پودر آکریدین اورنج و محلول‌های آن سمی هستند؟
بله، آکریدین اورنج به عنوان ماده اینترکالیت‌شونده یک جهش‌زای پتانسیل (Mutagen) است و حین وزن‌کشی و کار با آن باید الزامات ایمنی شامل استفاده از دستکش و هود رعایت شود.
نقد و بررسی‌ها
هنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.