برفلدین آ سیگما کد B7651 | پودر Brefeldin A اصل
برفلدین آ (Brefeldin A) با کد محصول B7651 از تولیدات شرکت سیگما-آلدریچ، یک متابولیت ضدقارچی لاکتونی است که از قارچ *Penicillium brefeldianum* مشتق می‌شود و یکی از شناخته‌شده‌ترین مهارکننده‌های انتقال وزیکولی داخل‌سلولی به شمار می‌رود. برفلدین آ با مهار فاکتورهای تبادل نوکلئوتید گوانین (GEFs) برای پروتئین‌های Arf1، مانع از جذب پوشش‌های پروتئینی COP-I به وزیکول‌ها شده و در نتیجه سبب اختلال سریع و بازگشت‌پذیر در دستگاه گلژی و بازجذب آن به درون شبکه آندوپلاسمی (ER) می‌شود. این ویژگی برفلدین آ را به ابزاری طلایی در سنجش‌های فلوسایتومتری داخل‌سلولی (Intracellular Cytokine Staining) جهت تجمع سایتوکاین‌ها درون سلول و مهار ترشح پروتئینی مبدل کرده است.
کاربردها
| عنوان کاربرد | توضیح |
|---|---|
| رنگ‌آمیزی سایتوکاین‌های درون‌سلولی (ICS) | مهار ترشح سایتوکاین‌ها به محیط خارج و تجمیع پروتئین‌های هدف در سلول‌های ایمنی جهت آنالیز با فلوسایتومتری |
| مطالعات ساختار و دینامیک دستگاه گلژی | بررسی فرآیندهای ادغام، بازآرایی و پویایی غشاهای داخل‌سلولی شبکه آندوپلاسمی و گلژی |
| پژوهش‌های گلیکوزیلاسیون پروتئین‌ها | مسدود کردن مسیر ترابری جهت تحلیل مراحل تغییرات پس از ترجمه و قندی‌شدن زنجیره‌ها |
| القا و پایش استرس شبکه آندوپلاسمی (ER Stress) | تجمع پروتئین‌های تاخورده‌نشده در لومن شبکه آندوپلاسمی و فعال‌سازی پاسخ UPR |
ویژگی‌ها و مشخصات
| ویژگی | مقدار |
|---|---|
| نام محصول | Brefeldin A from Penicillium brefeldianum |
| برند سازنده | سیگما-آلدریچ (Sigma-Aldrich) |
| کد کاتالوگ | B7651 |
| شماره ثبت CAS | 20350-15-6 |
| فرمول مولکولی | C16H24O4 |
| وزن مولکولی | 280.36 g/mol |
| خلوص (Assay) | حداقل ۹۹ درصد (HPLC & TLC) |
| شکل فیزیکی | پودر کریستالی سفید و خالص |
| حلالیت | محلول در DMSO (تا ۱۰ میلی‌گرم در میلی‌لیتر) و متانول |
| شرایط نگهداری | دمای ۲۰- درجه سانتی‌گراد، نگهداری در ظروف در بسته و خشک |
مزایا
| عنوان مزیت | توضیح |
|---|---|
| اثرگذاری سریع و کاملاً برگشت‌پذیر (Reversible) | بازسازی کامل ساختار گلژی و از سرگیری ترشح طبیعی پروتئین‌ها پس از شستشوی سلول‌ها |
| خلوص استثنایی بالای ۹۹ درصد | تضمین بالاترین کیفیت سیگنالینگی و حذف اثرات تداخلی بر زیست‌پذیری سلول‌های حساس لنفوسیت |
| حفظ ساختار پروتئین‌های درون وزیکول | تجمع حداکثری اینترفرون‌ها، اینترلوکین‌ها و فاکتورهای نکروز تومور بدون دناتوره شدن اپی‌توپ‌ها |
| استاندارد جهانی در ایمونوفنوتایپینگ | مورد تأیید تمامی دستورالعمل‌های مرجع بین‌المللی در آزمایش‌های سنجش فعالیت لنفوسیت‌های T |
سوالات متداول
تفاوت اصلی برفلدین آ (BFA) و موننسین (Monensin) در مهار ترشح چیست؟
برفلدین آ انتقال میان شبکه آندوپلاسمی و گلژی را مسدود می‌کند؛ در حالی که موننسین یک یونوفور سدیم/هیدروژن است که ترابری را در خود وزیکول‌های ترشحی شبکه ترانس گلژی (TGN) متوقف می‌سازد.
غلظت کاری و مدت زمان انکوباسیون برفلدین آ در سنجش سایتوکاین چقدر است؟
معمولاً با غلظت کاری ۱ تا ۱۰ میکروگرم در میلی‌لیتر (حدود ۳.۵ تا ۱۸ میکرومولار) به مدت ۴ تا ۶ ساعت همراه با محرک‌های سلولی (مانند PMA و Ionomycin) به سلول‌ها اضافه می‌شود.
آیا اثر برفلدین آ روی سلول‌ها سمی و کشنده است؟
در بازه‌های زمانی کوتاه (زیر ۶ تا ۸ ساعت) سمیتی ندارد و کاملاً برگشت‌پذیر است، اما انکوباسیون‌های طولانی‌مدت (بالای ۲۴ ساعت) به دلیل استرس شدید ER ممکن است به آپوپتوز سلولی منجر شود.
نقد و بررسی‌ها
هنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.