هایگرومایسین بی سیگما کد H3274 | Hygromycin B اصل
هایگرومایسین بی (Hygromycin B) با کد محصول H3274 از تولیدات معتبر کمپانی سیگما-آلدریچ، یک آنتی‌بیوتیک آمینوگلیکوزیدی قوی است که از باکتری *Streptomyces hygroscopicus* استخراج می‌شود. این ترکیب با مهار بیوسنتز پروتئین از طریق القای خطای خوانش کدون‌ها و توقف جابجایی ریبوزومی روی زیرواحد 30S و 70S/80S عمل می‌کند. هایگرومایسین بی طیف اثر بسیار گسترده‌ای دارد و با مهار باکتری‌ها، قارچ‌ها و سلول‌های یوکاریوتی پستانداران، یک ابزار انتخابی کلیدی در ترنسفکشن و ژنتیک مولکولی محسوب می‌شود. استفاده از این آنتی‌بیوتیک در کنار ژن مقاومت hyg یا hph امکان گزینش سریع و انتخابی رده‌های سلولی تراریخته پایدار را با حداقل کلون‌های مثبت کاذب فراهم می‌آورد.
کاربردها
| عنوان کاربرد | توضیح |
|---|---|
| گزینش رده‌های سلولی پستانداران تراریخته | انتخاب کلون‌های سلولی پایدار پس از انتقال پلاسمیدهای واجد ژن مقاومت Hygromycin Phosphotransferase |
| تراریختی گیاهی و اگروباکتریوم | غربالگری کالوس‌ها و بافت‌های تراریخته گیاهی حامل سازه‌های مقاومتی |
| کلونینگ و دستکاری ژنتیکی مخمرها | گزینش سویه‌های ترنسفورم‌شده مخمر *Saccharomyces cerevisiae* و گونه‌های *Pichia* |
| انتخاب دوگانه (Dual Selection) | استفاده هم‌زمان در کنار آنتی‌بیوتیک‌هایی مانند G418 یا پورومایسین برای تثبیت هم‌زمان دو ترنس‌ژن مجزا |
ویژگی‌ها و مشخصات
| ویژگی | مقدار |
|---|---|
| نام محصول | Hygromycin B from Streptomyces hygroscopicus |
| برند سازنده | سیگما-آلدریچ (Sigma-Aldrich) |
| کد کاتالوگ | H3274 |
| شماره ثبت CAS | 31282-04-9 |
| فرمول مولکولی | C20H37N3O13 |
| وزن مولکولی | 527.52 g/mol |
| فرم عرضه محصول | محلول فیلترشده در آب یا بافر فسفات (غلظت استاندارد حدود ۵۰ میلی‌گرم در میلی‌لیتر) |
| فعالیت زیستی (Potency) | حداقل ۱۰۰۰ واحد در هر میلی‌گرم |
| گرید کیفی | مناسب برای کشت سلولی (BioReagent, Cell Culture Tested) |
| شرایط نگهداری | دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی‌گراد، محافظت در برابر انجمادهای مکرر |
مزایا
| عنوان مزیت | توضیح |
|---|---|
| کارایی بسیار سریع در کشتن سلول‌های حساس | مرگ سلول‌های منفی بدون ژن مقاومت ظرف ۳ تا ۵ روز از آغاز تیمار |
| پایداری حرارتی و شیمیایی بالا در محیط کشت | حفظ توان مهاری کامل در دمای انکوباتور ۳۷ درجه سانتی‌گراد تا چند هفته |
| تأییدیه تست زیستی برای کشت سلول | فیلتر شده و فاقد اندوتوکسین‌های باکتریایی جهت جلوگیری از مسمومیت سلول‌های میزبان |
| سازگاری گسترده با انواع سیستم‌های یوکاریوتی | قابلیت غربالگری مؤثر در سلول‌های پستانداران، بندپایان، مخمرها و گیاهان |
سوالات متداول
چگونه دوز مناسب هایگرومایسین بی را برای رده سلولی خود تعیین کنیم؟
باید آزمایش منحنی کشندگی (Kill Curve) انجام شود. سلول‌های ترنسفکت‌نشده را با غلظت‌های مختلف از ۵۰ تا ۱۰۰۰ میکروگرم در میلی‌لیتر انکوبه کرده و کمترین غلظتی که ظرف ۱۰ تا ۱۴ روز تمامی سلول‌ها را حذف می‌کند به عنوان دوز کاری انتخاب کنید.
آیا محلول هایگرومایسین B را می‌توان در ۲۰- درجه سانتی‌گراد فریز کرد؟
بهترین شرایط نگهداری این محلول دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی‌گراد است. انجماد و ذوب مکرر ممکن است توان زیستی آن را کاهش دهد، اما نگهداری کوتاه‌مدت الیکوت‌های بدون چرخه یخ‌گشایی مانعی ندارد.
مکانیسم مقاومت ژن Hygromycin B phosphotransferase چیست؟
این آنزیم با فسفوریلاسیون اختصاصی گروه هیدروکسیل مولکول هایگرومایسین، آن را کاملاً غیرفعال کرده و اجازه اتصال به ریبوزوم سلول میزبان را نمی‌دهد.
نقد و بررسی‌ها
هنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.