محیط کشت استارچ کازئن آگار Starch Casein Agar یا SCA
برند :کیولب
محیط کشت استارچ-کازئین آگار که با نام اختصاری SCA نیز شناخته میشود، یک محیط انتخابی برای تشخیص و جداسازی باکتریهای اکتینومیستها (Actinomycetes) و همچنین باکتریهای مایل به تجزیه نشاسته است.
ویژگیها و کاربردهای محیط کشت استارچ کازئین آگار:
| جداسازی و کشت اکتینومیستها: محیط SCA به طور خاص برای جداسازی و کشت اکتینومیستها که گروهی از باکتریهای رشتهای هستند، کاربرد دارد. |
| جداسازی باکتریهای ساکارولیتیک: از این محیط برای جداسازی باکتریهایی که توانایی تجزیه نشاسته (ساکارولیتیک) را دارند نیز استفاده میشود. |
| مطالعات اکوسیستم میکروبی به دلیل توانایی در رشد انواع مختلف میکروارگانیسمها، SCA در مطالعات اکوسیستمهای میکروبی نیز کاربرد دارد. : |
| حفظ طولانی مدت کشت: نشاسته کازئین آگار با روشهای استاندارد برای جداسازی و حفظ فرهنگ آکتینومایستها برای مدت زمان طولانیتر توصیه میشود. |
| تهیه محیط: برای تهیه این محیط، معمولاً 63 گرم از پودر محیط کشت را در 1000 میلیلیتر آب مقطر حل کرده و پس از حرارت دادن برای حل شدن کامل، با اتوکلاو استریل میکنند. |
ترکیب شیمیایی و اصول محیط
| 1. نشاسته محلول (Soluble Starch): این ترکیب بهعنوان منبع اصلی کربن در محیط استفاده میشود. باکتریهایی مانند اکتینومیستها که توانایی تجزیه نشاسته دارند، از این ماده برای رشد و متابولیسم استفاده میکنند. |
| 2. کازئین (Casein): نوعی پروتئین شیر است که در این محیط بهعنوان منبع نیتروژن و اسیدهای آمینه بهکار میرود. تجزیه آن توسط آنزیمهای باکتریایی میتواند شاخصی برای فعالیت آنزیمهای پروتئولیتیک باشد. |
| 3. دیهیدروژن فسفات پتاسیم (Potassium Dihydrogen Phosphate – KH₂PO₄): نقش بافری دارد و به تنظیم pH محیط در محدوده خنثی (حدود ۷) کمک میکند. همچنین بهعنوان منبع فسفر ضروری برای رشد سلولی عمل میکند. |
| 4. نیترات پتاسیم (Potassium Nitrate – KNO₃): منبع نیتروژن غیرآلی برای بسیاری از میکروارگانیسمهاست که نیتروژن را به ترکیبات قابل استفاده زیستی تبدیل میکنند. |
| 5. سولفات منیزیم (Magnesium Sulfate – MgSO₄·7H₂O): منبع منیزیم است که برای فعالیت بسیاری از آنزیمها ضروری بوده و در سنتز اسیدهای نوکلئیک نقش دارد. |
| 6. کربنات کلسیم (Calcium Carbonate – CaCO₃): بهعنوان منبع کلسیم عمل میکند و ممکن است در بافر کردن محیط نقش جزیی داشته باشد. همچنین به تثبیت pH کمک میکند. |
| 7. سولفات آهن (Ferrous Sulfate – FeSO₄·7H₂O): آهن برای بسیاری از فرآیندهای متابولیکی باکتریها حیاتی است، از جمله فعالیت آنزیمهای تنفسی و مسیرهای تولید انرژی. |
| 8. آگار (Agar): یک پلیساکارید استخراجشده از جلبکهای دریایی است که برای جامدسازی محیط استفاده میشود. خود آگار بهعنوان منبع غذایی برای اکثر باکتریها قابل استفاده نیست، بنابراین انتخاب خوبی برای رشد انتخابی است. |
| 9. آب مقطر یا آب دریا: اگر هدف جداسازی اکتینومیستهای دریایی باشد، آب دریا (استریلشده) انتخاب بهتری است. برای نمونههای خاکی یا عادی، آب مقطر کافی است. |
| 10. تنظیم pH: معمولاً pH محیط پس از ترکیب مواد در حدود ۷.۰ تا ۷.۲ تنظیم میشود که برای رشد اکثر گونههای اکتینومیست مناسب است. |
طرز تهیه محیط کشت
| 1. وزنکردن مواد خشک طبق جدول بالا |
| 2. حلکردن کامل مواد در ۱ لیتر آب مقطر یا آب دریا با حرارت ملایم |
| 3. تنظیم pH در حدود ۷.۲ با استفاده از محلول NaOH یا HCl در صورت نیاز |
| 4. اتوکلاو کردن: به مدت ۱۵ دقیقه در دمای ۱۲۱ درجه سانتیگراد و فشار ۱۵ psi |
| 5. خنککردن تا دمای ۴۵–۵۰ درجه و ریختن در پتری دیشها |
مزایا محیط کشت استارچ کازئن آگار Starch Casein Agar یا SCA
| محیط انتخابی نسبتاً اختصاصی برای اکتینومیستها |
| دارای منابع غذایی ساده اما کافی برای رشد میکروارگانیسمهای خاص |
| قابل تنظیم برای کاربردهای دریایی یا خاکی |
| مناسب برای غربالگری زیستی در تحقیقات دارویی |
| هزینه مناسب و روش تهیه آسان |
محدودیت محیط کشت استارچ کازئن آگار Starch Casein Agar یا SCA
| رشد باکتریهای ناخواسته مانند باسیلوسها در صورت عدم استفاده از آنتیبیوتیک |
| عدم توانایی جداسازی کامل برخی گونههای نادر اکتینومیست |
| نیاز به دوره انکوباسیون طولانی (حداقل ۷ تا ۱۴ روز برای مشاهده رشد واضح) |
نکات تکمیلی و تخصصی
| برای انتخابیتر شدن محیط میتوان آنتیبیوتیکهایی مانند سیکلوسرین، ریفامپین یا نالیدیکسیک اسید به آن افزود تا رشد باکتریهای مزاحم مهار شود. |
| استفاده از آب دریا استریلشده در مطالعات باکتریهای دریایی باعث افزایش راندمان جداسازی میشود. |
| افزودن معرف یُد بعد از رشد، به تشخیص آنزیم آمیلاز کمک میکند. |
| محیط را میتوان با مواد مغذی مکمل مانند ویتامینها یا منابع سولفور خاص اصلاح کرد. |
نکات ایمنی
| هنگام تهیه محیط کشت، از دستکش، ماسک و عینک ایمنی استفاده شود. |
| اتوکلاو باید طبق دستورالعمل ایمنی دستگاه کار شود. |
| باقیمانده محیط استفادهنشده باید در محل مناسب نگهداری یا امحاء شود. |
| در کار با اکتینومیستها، به دلیل پتانسیل تولید اسپوردار بودن، از هود میکروبی استفاده شود. |
نقد و بررسیها
هنوز بررسیای ثبت نشده است.