محیط کشت تریپل شوگر آیرون آگار (TSI) | محیط تشخیصی کلیدی در میکروبیولوژی بالینی
محیط کشت تریپل شوگر آیرون آگار (Triple Sugar Iron Agar) که به اختصار TSI شناخته میشود، یک محیط کشت افتراقی نیمه جامد چندکاره است که برای شناسایی اولیه و افتراق باکتریهای گرم منفی رودهای بهویژه اعضای خانواده انتروباکتریاسه و جنسهای مرتبط مانند ویبریوناسه و سودوموناس کاربرد گستردهای دارد. این محیط با بررسی چند ویژگی بیوشیمیایی همزمان، یک ابزار غربالگری سریع و ارزشمند در آزمایشگاههای تشخیصی محسوب میشود.
ترکیبات اصلی و نشانگرهای محیط TSI:
-
سه قند (Triple Sugar):
-
گلوکز (دکستروز): 0.1% – فقط در بخش عمقی (Butt) تخمیر میشود.
-
ساکارز: 1% – در سطح (Slant) قابل تخمیر است.
-
لاکتوز: 1% – در سطح (Slant) قابل تخمیر است.
-
-
شناساگر pH: فنول رد (Phenol Red) – رنگ محیط در pH خنثی قرمز-نارنجی است.
-
زرد شدن: نشانه تولید اسید (پایین آمدن pH) در اثر تخمیر قند.
-
قرمز/صورتی شدن: نشانه قلیایی شدن (افزایش pH) در اثر تخمیر پروتئینها.
-
-
شناساگر تولید گاز H₂S: فسفات آهن (فریک) و تیوسولفات سدیم.
-
سیاه شدن محیط: نشانه تشکیل رسوب سولفید آهن (FeS) در اثر تولید گاز هیدروژن سولفوره.
-
-
پپتون: به عنوان منبع نیتروژن.
طراحی منحصربهفرد لوله TSI (اسلنت):
-
شیب سطحی (Slant): در معرض اکسیژن – شرایط هوازی.
-
عمق (Butt): کماکسیژن – شرایط بیهوازی نسبی.
این طراحی امکان مشاهده الگوهای مختلف تخمیر را فراهم میکند.
کاربردهای اصلی محیط کشت TSI:
| تشخیص افتراقی انتروباکتریاسه: شناسایی اولیه اشرشیاکلی، سالمونلا، شیگلا، کلبسیلا، پروتئوس، انتروباکتر و سیتروباکتر. |
| غربالگری سویههای مشکوک به سالمونلا و شیگلا: در آزمایش مدفوع (کشت stool) و نمونههای غذایی. |
| شناسایی باکتریهای گرم منفی غیرتخمیرکننده: مانند سودوموناس آئروژینوزا. |
| آزمایشگاههای کنترل کیفیت مواد غذایی و آب: برای ردیابی شاخصهای آلودگی مدفوعی. |
| آموزش میکروبیولوژی: بهعنوان یک محیط آموزشی کلاسیک برای یادگیری بیوشیمی باکتریایی. |
تفسیر الگوهای رایج رشد در محیط TSI:
| الگوی سطح/عمق | تفسیر احتمالی | مثالهای باکتریایی |
|---|---|---|
| قرمز/زرد (K/A) | تنها گلوکز تخمیر شده. سطح قلیایی (قرمز)، عمق اسیدی (زرد). | Salmonella spp., Shigella spp., Pseudomonas aeruginosa |
| زرد/زرد (A/A) | هم گلوکز و هم ساکارز/لاکتوز تخمیر شدهاند. سطح و عمق هر دو اسیدی (زرد). | E. coli, Klebsiella spp., Enterobacter spp. |
| قرمز/قرمز (K/K) | هیچ قندی تخمیر نشده. پروتئینها متابولیزه شدهاند (قلیایی شدن). سطح و عمق قلیایی (قرمز). | Acinetobacter spp., برخی سویههای Pseudomonas |
| سیاه شدن عمق | تولید گاز H₂S (با هر الگوی رنگی دیگر همراه است). | Salmonella Typhi, Proteus vulgaris, برخی Citrobacter |
| شکاف یا حباب در عمق | تولید گاز (CO₂/H₂) از تخمیر قندها. | E. coli, Enterobacter aerogenes |
مزایای استفاده از محیط TSI:
| چندکاره بودن: بررسی چند ویژگی (تخمیر سه قند، تولید H₂S و گاز) در یک لوله. |
| سریع و مقرونبهصرفه: جواب اولیه در 18-24 ساعت. |
| افتراق اولیه ارزشمند: کمک به انتخاب تستهای تأییدی بعدی. |
| استاندارد جهانی: استفاده گسترده در پروتکلهای تشخیصی (CLSI). |
| ساده و قابل اعتماد. |
روش کار و تلقیح صحیح (روش ستونگیری):
-
تهیه لوله: محیط به صورت لولههای اسلنت (شیب دار) آماده میشود.
-
تلقیح: با یک آنس حلقوی، کلنی مورد نظر را برداشته و:
-
ابتدا عمق (Butt) لوله را به صورت خطی تا انتها فرو میبریم (شرایط بیهوازی).
-
سپس در حین خارج کردن، بر روی سطح (Slant) به صورت زیگزاگ میکشیم (شرایط هوازی).
-
-
انکوباسیون: به مدت 18-24 ساعت در دمای 35-37 درجه سانتیگراد.
-
خوانش نتیجه: تغییر رنگ سطح و عمق، سیاه شدن و ایجاد شکاف بررسی میشود.
چرا محیط کشت TSI را از ما خریداری کنید؟
-
تأمین از برندهای معتبر: مرک (Merck)، هایمدیا (Himedia)، کاندا (Condalab) و تولید داخلی باکیفیت.
-
تنوع عرضه: پودر خشک (بستههای 500 گرمی و 100 گرمی) و لولههای آماده مصرف.
-
کیفیت تضمینی: تضمین باروری، pH صحیح و واکنشهای افتراقی استاندارد.
-
مشاوره تخصصی: کمک در تفسیر الگوهای پیچیده یا غیرمعمول.
-
ارسال سریع: به همراه دستورالعمل فارسی آمادهسازی و تفسیر.
سوالات متداول (FAQ):
سوال: آیا محیط TSI برای تشخیص افتراقی سالمونلا و شیگلا کافی است؟
پاسخ: خیر. TSI یک تست غربالگری و افتراق اولیه است. تشخیص نهایی سالمونلا و شیگلا نیازمند تستهای بیوشیمیایی بیشتر (مانند IMViC، اوره) و تستهای سرولوژی (آگلوتیناسیون) است.
سوال: باکتری که فقط گلوکز را تخمیر میکند (الگوی K/A)، چرا سطح قلیایی میشود؟
پاسخ: مقدار کم گلوکز در عمق به سرعت مصرف میشود. باکتری سپس برای تأمین انرژی به متابولیسم پپتونها روی میآورد که تولید آمونیاک (قلیا) میکند و از آنجایی که سطح در تماس با هوا است، این قلیاییشدن در سطح آشکار میشود.
سوال: آیا محیط TSI برای باکتریهای گرم مثبت کاربرد دارد؟
پاسخ: خیر. این محیط اختصاصاً برای باکتریهای گرم منفی رودهای طراحی شده است. باکتریهای گرم مثبت معمولاً رشد ضعیفی دارند یا واکنشهای غیرقابل تفسیر ایجاد میکنند.
سوال: تولید گاز (شکاف) بدون زرد شدن عمق ممکن است؟
پاسخ: خیر. تولید گاز نتیجه تخمیر قندها و تولید اسید است. بنابراین حتماً باید همراه با زرد شدن (اسیدی شدن) باشد.
سوال: شرایط نگهداری لولههای آماده TSI چگونه است؟
پاسخ: لولههای آماده در دمای 2-8 درجه سانتیگراد، دور از نور مستقیم و به صورت عمودی نگهداری شوند. قبل از استفاده از عدم ترکخوردگی محیط اطمینان حاصل کنید.
سفارش و مشاوره میکروبیولوژی تشخیصی
برای دریافت جدول کامل تفسیر TSI، لیست قیمت برندهای مختلف و راهنمای انتخاب بین پودر و لوله آماده، با بخش فروش محیطهای کشت افتراقی ما تماس بگیرید.
نقد و بررسیها
هنوز بررسیای ثبت نشده است.