معرف رنگی نایترو بلو تترازولیوم NBT سیگما N6876 اصل
معرف نایترو بلو تترازولیوم سیگما (Nitro blue tetrazolium chloride – NBT) یک ترکیب تترازولیومی حساس به ریدوکس است که به عنوان شناساگر رنگسنجی در بیوشیمی، ایمونولوژی و هیستوشیمی کاربرد بنیادین دارد. این معرف زرد رنگ و محلول در آب، پس از پذیرش الکترون و احیا شدن توسط دهیدروژنازها، رادیکالهای سوپراکسید یا واکنشهای آنزیمی، به رسوب نامحلول و آبی تیره رنگ فورمازان (Formazan) تبدیل میشود. این تغییر رنگ غیرقابل بازگشت اساس روشهای تشخیصی مختلف را تشکیل میدهد. در تکنیکهای نورترن بلات، وسترن بلات و ایمونوهیستوشیمی، جفت شدن NBT با BCIP به عنوان سوبسترای آلکالین فسفاتاز، سیگنالهای پرقدرت و پایداری تولید میکند.
کاربردها
| عنوان کاربرد | توضیح |
|---|---|
| تست تنفسی انفجاری نوتروفیلها | سنجش فعالیت متابولیکی فاگوسیتها و تشخیص بیماری گرانولوماتوز مزمن (CGD) |
| ردیابی لکههای وسترن و ساترن بلات | ترکیب با BCIP به عنوان سوبسترای کروموژنیک حساس آنزیم آلکالین فسفاتاز |
| رنگآمیزی بافتی و هیستوشیمی | شناسایی فعالیت دهیدروژنازها و رادیکالهای آزاد سوپراکسید در مقاطع بافتی |
| سنجشهای قابلیت زیست سلولی | ارزیابی زنده ماندن سلولها بر اساس فعالیت متابولیکی دهیدروژنازهای فعال |
ویژگیها و مشخصات
| ویژگی | مقدار |
|---|---|
| نام محصول | Nitro blue tetrazolium chloride |
| کد کاتالوگ سیگما | N6876 |
| شماره CAS | 298-83-9 |
| فرمول مولکولی | C40H30Cl2N10O6 |
| وزن مولکولی | 817.64 g/mol |
| فرم ظاهری | پودر کریستالی زرد رنگ |
| شرایط انبارش | دمای 2 تا 8 درجه سانتیگراد، محافظت در برابر نور مستقیم |
مزایا
| عنوان مزیت | توضیح |
|---|---|
| حساسیت فوقالعاده در بلاتینگ | ایجاد باندهای با کنتراست بالا بدون پسزمینه در ترکیب با BCIP |
| رسوب پایدار و غیرقابل شستشو | پایداری طولانیمدت رنگ فورمازان در محیطهای آبی بدون محو شدن سیگنال |
| شاخص دقیق استرس اکسیداتیو | قابلیت برهمکنش مستقیم و سریع با آنیون سوپراکسید در سلولهای زنده |
| خلوص آنالیتیکال بالا | تولید شده با کمترین ناخالصی به منظور جلوگیری از احیای خودبهخودی معرف |
سوالات متداول
روش نگهداری محلول آماده NBT چیست؟
محلول استوک NBT باید در ویالهای تیره یا پوشیده از فویل آلومینیوم در دمای ۲۰- درجه نگهداری شود زیرا نور محیط باعث احیای ناخواسته و تغییر رنگ آن میگردد.
چرا در روشهای تشخیص آنزیمی NBT را همراه با BCIP استفاده میکنند؟
هیدرولیز BCIP توسط آلکالین فسفاتاز الکترون آزاد میکند و NBT با جذب این الکترونها به فورمازان نامحلول ارغوانی-آبی تیره تبدیل شده و حساسیت سیگنال را چند برابر میکند.
رسوب فورمازان تولیدشده در چه حلالهایی حل میشود؟
فورمازان رسوبکرده در آب نامحلول است اما میتوان آن را در دیمتیل سولفوکسید (DMSO) یا متانول به منظور سنجشهای اسپکتروفتومتری حل کرد.
نقد و بررسیها
هنوز بررسیای ثبت نشده است.