کلسین AM سیگما کد C1359 اصل | رنگ فلورسنت سلول زنده

 

کلسین اِی‌ام (Calcein AM) با کد محصول C1359 برند سیگما-آلدریچ، یکی از محبوب‌ترین و دقیق‌ترین رنگ‌های فلورسنت غیرسمی جهت ارزیابی زنده مانی، سنجش سمیت سلولی و فلوسایتومتری است. این ترکیب به دلیل داشتن گروه‌های استوکسی‌متیل استر (AM)، آب‌گریز بوده و به راحتی از غشای سلول‌های زنده نفوذ می‌کند. پس از ورود به سیتوپلاسم، استرازهای فعال درون سلول آن را هیدرولیز کرده و به مولکول قطبی و به شدت فلورسنت کلسین تبدیل می‌کنند که در سلول‌های سالم با غشای یکپارچه به دام افتاده و فلورسانس سبز درخشان ساطع می‌نماید.

کاربردها

عنوان	توضیح
سنجش زنده‌مانی سلول (Cell Viability)	تشخیص و شمارش اختصاصی سلول‌های زنده در آزمون‌های سمیت و داروسازی
رنگ‌آمیزی همزمان زنده/مرده (Live/Dead)	استفاده همراه با پروپیدیوم یدید (PI) جهت تمایز دقیق سلول‌های زنده و مرده
میکروسکوپی فلورسانس و کانفوکال	تصویربرداری شفاف از ساختار و مورفولوژی سلول‌های زنده در شرایط برون‌تن
فلوسایتومتری و غربالگری پربازده (HTS)	آنالیز کمی وضعیت فیزیولوژیک جمعیت‌های سلولی در پلیت‌های کشت

ویژگی‌ها و مشخصات

ویژگی	مقدار
نام محصول	Calcein AM (Acetoxymethyl ester)
برند سازنده	Sigma-Aldrich
کد کاتالوگ	C1359
شماره CAS	148504-34-1
فرمول مولکولی	C46H46N2O23
وزن مولکولی	۹۹۴.۸۶ گرم بر مول
طول موج تحریک و نشر (Ex/Em)	۴۹۵ نانومتر (تحریک) / ۵۱۵ نانومتر (نشر سبز)
حلالیت	محلول در حلال خشک DMSO تا غلظت ۵ میلی‌مولار
شرایط نگهداری	منفی ۲۰ درجه سانتی‌گراد در محیط کاملاً تاریک و خشک

مزایا

عنوان	توضیح
سایتوتوکسیستی بسیار ناچیز	عدم تداخل با متابولیسم و چرخه رشد سلول در طول زمان تصویربرداری
سیگنال فلورسانس شفاف و پرنور	نسبت سیگنال به نویز عالی به دلیل فعال شدن رنگ تنها درون سلول‌های زنده
سرعت نفوذ و انکوباسیون سریع	رنگ‌آمیزی یکنواخت سلول‌ها ظرف کمتر از ۱۵ تا ۳۰ دقیقه
سازگاری کامل با فیلترهای استاندارد FITC	قابلیت خوانش با انواع میکروسکوپ‌های فلورسنت و دستگاه‌های پلیت ریدر متداول

سوالات متداول

کلسین AM چگونه بین سلول زنده و مرده تمایز قائل می‌شود؟

تنها سلول‌های زنده دارای استراز فعال و غشای سالم هستند که کلسین AM را هیدرولیز کرده و رنگ فلورسنت سبز را در داخل خود به دام می‌اندازند، در حالی که در سلول مرده رنگ نشت کرده یا هیدرولیز نمی‌شود.

چرا نگهداری Calcein AM در شرایط بدون رطوبت الزامی است؟

گروه‌های استری این مولکول در مجاورت رطوبت هیدرولیز خودبه‌خودی شده و توانایی نفوذ به درون سلول را از دست می‌دهند.

غلظت کاری مناسب Calcein AM در کشت سلول چقدر است؟

غلظت کاری بهینه معمولاً بین ۱ تا ۵ میکرومولار در بافر فسفات (PBS) فاقد سرم است.