دی-لوسیفرین پتاسیم سیگما کد L6882 | D-Luciferin اصل
دی-لوسیفرین نمک پتاسیم (D-Luciferin potassium salt) با کد محصول L6882 از تولیدات سیگما-آلدریچ، سوبسترای طبیعی و با کیفیت فوق‌العاده برای آنزیم لوسیفراز کرم شب‌تاب (*Photinus pyralis*) است. در حضور ATP، اکسیژن و یون منیزیم ($Mg^{2+}$)، آنزیم لوسیفراز اکسیداسیون دی-لوسیفرین را کاتالیز کرده و به تشکیل اکسی‌لوسیفرین برانگیخته منجر می‌شود که بازگشت آن به حالت پایه نوری با طول‌موج حدود ۵۶۰ نانومتر (نور زرد-سبز) ساطع می‌نماید. این واکنش زیست‌تابی (Bioluminescence) به دلیل فقدان فلورسانس پس‌زمینه و حساسیت بالا، پایه اصلی انواع سنجش‌های ژن گزارشگر، تصویربرداری *in vivo* از حیوانات آزمایشگاهی و ارزیابی کمی سطح ATP است.
کاربردها
| عنوان کاربرد | توضیح |
|---|---|
| سنجش ژن گزارشگر لوسیفراز (Luciferase Reporter Assay) | پایش دقیق فعالیت پروموترها، فاکتورهای رونویسی و بیان ژن‌ها در سلول‌های ترنسفکت‌شده |
| تصویربرداری نوری غیرتهاجمی در موجود زنده (BLI In Vivo) | ردیابی رشد و متاستاز سلول‌های توموری و پایش سلول‌های بنیادی در بدن موش آزمایشگاهی |
| سنجش کمی ATP و زیست‌پذیری سلولی | اندازه‌گیری مقادیر بسیار اندک و پیکومولار ATP درون‌سلولی جهت سنجش حیات و متابولیسم |
| آزمون‌های غربالگری دارویی با توان بالا (HTS) | بررسی فعالیت مهاری یا تحریکی ترکیبات کاندید دارویی بر روی مسیرهای پیام‌رسانی |
ویژگی‌ها و مشخصات
| ویژگی | مقدار |
|---|---|
| نام محصول | D-Luciferin potassium salt |
| برند سازنده | سیگما-آلدریچ (Sigma-Aldrich) |
| کد کاتالوگ | L6882 |
| شماره ثبت CAS | 115144-35-9 |
| فرمول مولکولی | C11H7KN2O3S2 |
| وزن مولکولی | 318.41 g/mol |
| طول موج نشری زیست‌تابی | حدود ۵۶۰ نانومتر (در pH فیزیولوژیک ۷.۸) |
| خلوص (Assay) | حداقل ۹۸ درصد (HPLC) |
| حلالیت | کاملاً محلول در آب مقطر دیونیزه و بافر PBS (تا ۵۰ میلی‌گرم در میلی‌لیتر) |
| شرایط نگهداری | دمای ۲۰- درجه سانتی‌گراد، محافظت کامل در برابر نور و اکسیژن |
مزایا
| عنوان مزیت | توضیح |
|---|---|
| خلوص انانتیومری بالا (فُرم اکتیو D) | تولید حداکثر شدت فوتون نوری بدون حضور ایزومر L که نقش مهارکننده رقابتی دارد |
| حلالیت آبی فوق‌العاده و آماده‌سازی آسان | انحلال سریع نمک پتاسیم در بافرهای فیزیولوژیک بدون نیاز به حلال‌های آلی سمی |
| عدم وجود سیگنال پس‌زمینه (Background-free) | ایجاد نسبت سیگنال به نویز عالی به علت تولید نور شیمیایی فاقد نیاز به نور تحریکی خارجی |
| نفوذپذیری مناسب بافتی در تصویربرداری زنده | پخش یکنواخت در سیستم گردش خون حیوانات آزمایشگاهی جهت تصویربرداری دقیق با سیستم IVIS |
سوالات متداول
روش تهیه و نگهداری محلول استوک دی-لوسیفرین پتاسیم چگونه است؟
پودر را در بافر PBS استریل (فاقد کلسیم و منیزیم) با غلظت ۱۵ تا ۳۰ میلی‌گرم در میلی‌لیتر حل کرده، با فیلتر ۰.۲۲ میکرون استریل کنید و در الیکوت‌های تیره در ۲۰- درجه سانتی‌گراد فریز نمایید.
دوز مصرفی دی-لوسیفرین برای تصویربرداری درون‌تنی موش (In Vivo) چقدر است؟
دوز استاندارد معمولاً ۱۵۰ میلی‌گرم به ازای هر کیلوگرم وزن بدن موش است که به صورت تزریق صفاقی (IP) حدود ۱۰ تا ۱۵ دقیقه پیش از ثبت تصویر تزریق می‌شود.
چرا نمک پتاسیم دی-لوسیفرین نسبت به اسید آزاد ارجحیت دارد؟
نمک پتاسیم انحلال‌پذیری بسیار سریعتری در آب و بافرهای زیستی با pH خنثی دارد و نیازی به تنظیم مجدد pH محلول نخواهد بود.
نقد و بررسی‌ها
هنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.