استرپتاویدین سیگما کد S4762 | پودر Streptavidin اصل
استرپتاویدین (Streptavidin) با کد محصول S4762 از تولیدات سیگما-آلدریچ، یک پروتئین تترامری غیرگلیکوزیله خالص استخراج‌شده از باکتری *Streptomyces avidinii* است. این پروتئین به دلیل برقراری یکی از قوی‌ترین پیوندهای غیرکووالانسی شناخته‌شده در طبیعت با ویتامین بیوتین ($K_d \approx 10^{-14} \text{ M}$) شهرت دارد. بر خلاف آویدین، استرپتاویدین فاقد زنجیره‌های قندی بوده و نقطه ایزوالکتریک خنثی‌تری (حدود ۵ تا ۶) دارد که سبب کاهش چشمگیر اتصالات غیراختصاصی و به حداقل رسیدن فلورسانس پس‌زمینه می‌گردد. این ماده در تکنیک‌های پیشرفته بیولوژی مولکولی از جمله وسترن بلات، الایزا، ایمونوهیستوشیمی، بلاتینگ و تخلیص بر پایه بیدهای مغناطیسی بیوتینیله کاربرد بنیادین دارد.
کاربردها
| عنوان کاربرد | توضیح |
|---|---|
| تقویت سیگنال در تکنیک‌های الایزا و وسترن بلات | اتصال به آنتی‌بادی‌های ثانویه بیوتینیله جهت دستیابی به بالاترین حساسیت تشخیصی |
| تخلیص پروتئین‌ها و اسیدهای نوکلئیک | استفاده به فرم کونژوگه با رزین و بیدهای مغناطیسی (Streptavidin Beads) جهت جداسازی مولکول‌های بیوتینیله |
| تصویربرداری فلورسانس و ایمونوهیستوشیمی | کونژوگاسیون با فلوروکروم‌ها (مانند FITC و Cy5) جهت آشکارسازی آنتی‌ژن‌های بسیار کم‌مقدار |
| فناوری‌های نانو و زیست‌حسگرها (Biosensors) | تثبیت لایه‌های زیستی بر روی سطوح سنسورها از طریق اتصال پایدار با پروب‌های بیوتینیله |
ویژگی‌ها و مشخصات
| ویژگی | مقدار |
|---|---|
| نام محصول | Streptavidin from Streptomyces avidinii |
| برند سازنده | سیگما-آلدریچ (Sigma-Aldrich) |
| کد کاتالوگ | S4762 |
| شماره ثبت CAS | 9013-20-1 |
| وزن مولکولی | حدود 53 kDa (تترامر همگن) |
| ظرفیت اتصال به بیوتین | حداقل ۱۴ واحد بر میلی‌گرم پروتئین (اتصال ۴ مولکول بیوتین به ازای هر تترامر) |
| شکل فیزیکی | پودر لیوفیلیزه سفید رنگ |
| حلالیت | کاملاً محلول در آب مقطر و بافر PBS (محلول شفاف و بی‌رنگ) |
| شرایط نگهداری | دمای ۲۰- درجه سانتی‌گراد در محیط خشک |
مزایا
| عنوان مزیت | توضیح |
|---|---|
| فقدان کامل اتصالات غیراختصاصی کربوهیدراتی | حذف واکنش با لکتین‌ها و گیرنده‌های قندی در بافت به علت نبود زنجیره‌های گلیکوزیل روی پروتئین |
| پایداری حرارتی، شیمیایی و آنزیمی بالا | مقاومت فوق‌العاده کمپلکس در برابر دناتوره‌کننده‌ها، SDS و تغییرات وسیع pH |
| خلوص الکتروفورزی بسیار بالا | تک‌باند در ژل SDS-PAGE و تکرارپذیری کامل در فرایندهای بیوکونژوگاسیون |
| افزایش چشمگیر حد تشخیص آنالیت‌ها | توانمندسازی روش‌های ایمونواسی برای ردیابی مقادیر در مقیاس پیکوگرم و فمتوگرم |
سوالات متداول
روش حل کردن و انبارداری محلول استرپتاویدین چگونه است؟
پودر لیوفیلیزه را در بافر PBS استریل با غلظت ۱ تا ۵ میلی‌گرم در میلی‌لیتر حل کنید. محلول را در حجم‌های کم الیکوت کرده و در دمای ۲۰- درجه سانتی‌گراد نگهداری نمایید. از فریز و ذوب مکرر خودداری شود.
چرا استرپتاویدین در مقایسه با آویدین زمینه (Background) کمتری ایجاد می‌کند؟
آویدین یک گلیکوپروتئین بازی با نقطه ایزوالکتریک حدود ۱۰ است که می‌تواند به اسیدهای نوکلئیک و ساختارهای قندی متصل شود؛ در حالی که استرپتاویدین فاقد قند بوده و pI خنثی دارد.
آیا پیوند استرپتاویدین-بیوتین برگشت‌پذیر است؟
این پیوند از قوی‌ترین اتصالات غیرکووالانسی است و در شرایط فیزیولوژیک برگشت‌ناپذیر محسوب می‌شود. جداسازی آن نیازمند شرایط دناتوره‌کننده شدید (مانند حرارت بالا همراه با بویلینگ در فرمامید یا بافر نمونه SDS) است.
نقد و بررسی‌ها
هنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.