سولفورودامین بی سیگما کد 230162 | رنگ SRB اصل

 

سولفورودامین بی (Sulforhodamine B sodium salt) با کد محصول 230162 از برند سیگما-آلدریچ، یک رنگ سنتزی فلورسنت، آنیونی و بر پایه آمینوکسانتن است که رنگ‌آمیزی پروتئین کل سلول را با ویژگی‌های استثنایی انجام می‌دهد. در شرایط اسیدی ملایم، گروه‌های سولفونیک اسید موجود در این رنگ از طریق پیوند الکترواستاتیک به باقیمانده‌های اسیدهای آمینه بازی در پروتئین‌های تثبیت‌شده سلولی متصل می‌شوند. میزان رنگ متصل‌شده پس از استخراج در بافر بازی مستقیماً متناسب با توده پروتئینی و در نتیجه تعداد سلول‌ها است. آزمون SRB روش استاندارد انستیتو ملی سرطان آمریکا (NCI) برای سنجش سمیت سلولی، تکثیر و غربالگری داروهای ضدسرطان به شمار می‌رود.

کاربردها

عنوان کاربرد	توضیح
سنجش سمیت و زیست‌پذیری سلولی (SRB Assay)	غربالگری داروها و سنجش چگالی سلول‌های چسبنده بر اساس اندازه‌گیری مقدار پروتئین کل
مطالعات تکثیر سلولی و مهار رشد (IC50)	تعیین دقیق شاخص‌های فارماکولوژیک مهار رشد سلول‌های توموری در پلیت‌های ۹۶ چاهکی
ردیابی جریان سیالات و هیدرولوژی	استفاده به عنوان ردیاب فلورسنت در مطالعات نفوذپذیری آب‌های زیرزمینی و بیومتریال
میکروسکوپ فلورسانس و طیف‌سنجی نوری	تصویربرداری کنتراست پروتئینی با طول‌موج نشری قرمز در حدود ۵۸۸ نانومتر

ویژگی‌ها و مشخصات

ویژگی	مقدار
نام محصول	Sulforhodamine B sodium salt
برند سازنده	سیگما-آلدریچ (Sigma-Aldrich)
کد کاتالوگ	230162
شماره ثبت CAS	3520-42-1
فرمول مولکولی	C27H29N2NaO7S2
وزن مولکولی	580.65 g/mol
محتوای رنگ (Dye Content)	حداقل ۷۵ تا ۸۰ درصد (گرید استاندارد صنعتی)
طول موج جذب و نشر (Absorbance/Emission)	جذب ماکسیمم در ۵۶۵ نانومتر (در فرم بازی) / نشر در ۵۸۸ نانومتر
حلالیت	محلول در آب (تا ۵۰ میلی‌گرم در میلی‌لیتر)، اسید استیک ۱٪ و متانول
شرایط نگهداری	دمای اتاق (۱۵ تا ۲۵ درجه سانتی‌گراد)، در ظروف کاملاً در بسته

مزایا

عنوان مزیت	توضیح
استقلال از فعالیت متابولیکی میتوکندری	برتری چشمگیر نسبت به تست MTT به دلیل عدم وابستگی به آنزیم‌های متابولیک و عدم تداخل ترکیبات احیاکننده
خطی بودن فوق‌العاده سیگنال نوری	رابطه کاملاً خطی بین جذب نوری و تعداد سلول‌ها در محدوده وسیع چگالی سلولی
پایداری رنگ متصل‌شده در پلیت	امکان نگهداری پلیت‌های رنگ‌آمیزی و خشک‌شده برای هفته‌ها پیش از خوانش با الایزا ریدر
مقرون‌به‌صرفه و مناسب غربالگری با تیراژ بالا	پروتکل ارزان‌قیمت، تکرارپذیر و سازگار با سیستم‌های اتوماسیون آزمایشگاهی

سوالات متداول

مراحل اصلی انجام تست سمیت با رنگ SRB چیست؟

سلول‌ها با تری‌کلرواستیک اسید (TCA) تثبیت شده، با محلول ۰.۰۵۷٪ SRB در اسید استیک ۱٪ رنگ‌آمیزی می‌شوند. پس از شستشو با اسید استیک ۱٪ و خشک شدن، رنگ با بافر تریس باز (Tris base ۱۰ میلی‌مولار) حل شده و جذب در ۵۱۰ تا ۵۶۵ نانومتر خوانده می‌شود.

چرا آزمون SRB نسبت به MTT دقت بالاتری در سنجش سمیت دارد؟

زیرا MTT فعالیت دهیدروژناز میتوکندری را می‌سنجد که ممکن است تحت تأثیر مستقیم داروها قرار گیرد؛ اما SRB توده پروتئینی کل سلول را اندازه‌گیری می‌کند و مستقل از نوسانات متابولیکی است.

رنگ SRB مازاد چگونه از چاهک‌ها شسته می‌شود؟

رنگ اضافی متصل‌نشده با محلول اسید استیک ۱ درصد شسته می‌شود، بدون آنکه رنگ متصل به پروتئین‌ها از بین برود.