آنزیم پاپائین سیگما کد P4762 | آنزیم Papain اصل
آنزیم پاپائین (Papain from papaya latex) با کد محصول P4762 از کمپانی سیگما-آلدریچ، یک اندوپپتیداز سیستئینی بسیار فعال است که از لاتکس گیاه خربزه درختی (*Carica papaya*) تخلیص می‌شود. این آنزیم پروتئولیتیک پیوندهای پپتیدی مجاور اسیدهای آمینه آب‌گریز، لیزین و آرژنین را با طیف اثر وسیع هیدرولیز می‌کند. ویژگی بارز پاپائین، فعالیت بهینه در محدوده وسیع دما و pH و توانایی هضم ملایم و کنترل‌شده پروتئین‌ها بدون آسیب به بافت‌های زمینه‌ای است. از این رو، پاپائین انتخابی ایده‌آل برای هضم ایمونوگلوبولین‌ها (تولید قطعات Fab و Fc) و جداسازی آنزیمی بافت‌ها و سلول‌های عصبی و غضروفی به شمار می‌رود.
کاربردها
| عنوان کاربرد | توضیح |
|---|---|
| جداسازی آنزیمی سلول‌های عصبی (Neuronal Dissociation) | تفکیک ملایم بافت مغز و نخاع جنینی جهت تهیه کشت‌های اولیه نورونی با بالاترین درصد حیات |
| تولید قطعات آنتی‌بادی Fab و Fc | برش اختصاصی ایمونوگلوبولین IgG در ناحیه لولا (Hinge Region) جهت مطالعات کریستالوگرافی و ایمونولوژی |
| هضم بافت غضروف و استخراج گلیکوزآمینوگلیکان‌ها | هضم ماتریکس غضروفی جهت استخراج و اندازه‌گیری کمی کلاژن و سولفات کندروئیتین |
| آماده‌سازی نمونه‌های پروتئومی و پپتیدی | برش پروتئین‌های مقاوم به تریپسین در مطالعات ساختاری و طیف‌سنجی جرمی |
ویژگی‌ها و مشخصات
| ویژگی | مقدار |
|---|---|
| نام محصول | Papain from papaya latex |
| برند سازنده | سیگما-آلدریچ (Sigma-Aldrich) |
| کد کاتالوگ | P4762 |
| شماره ثبت CAS | 9001-73-4 |
| شماره کمیسیون آنزیمی (EC Number) | 3.4.22.2 |
| وزن مولکولی | حدود 23.4 kDa |
| فعالیت ویژه آنزیمی (Specific Activity) | حداقل ۱۰ تا ۲۰ واحد در هر میلی‌گرم پروتئین (Units/mg) |
| شکل فیزیکی | پودر لیوفیلیزه سفید تا کرم مایل به قهوه‌ای |
| حلالیت | محلول در آب مقطر یا بافرهای استات و فسفات (محلول شفاف تا کمی کدر) |
| شرایط نگهداری | دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی‌گراد در محیط خشک و خنک |
مزایا
| عنوان مزیت | توضیح |
|---|---|
| جداسازی سلولی بسیار ملایم‌تر از تریپسین | حفظ ساختار گیرنده‌ها و زوائد ظریف نورونی در جداسازی بافت‌های حساس مغزی |
| فعالیت در محدوده گسترده اسیدیته و دما | حفظ توان هضم آنزیمی از pH ۵ تا ۹ و دمای ۳۰ تا ۶۰ درجه سانتی‌گراد |
| خلوص بالا و فعالیت زیستی تضمین‌شده | تولید طبق استانداردهای کیفی سیگما برای دستیابی به برش‌های آنزیمی با راندمان بالا |
| قابلیت فعال‌سازی آسان با عوامل احیاکننده | تحریک سریع فعالیت پروتئولیتیک در حضور سیستئین یا DTT |
سوالات متداول
آنزیم پاپائین چگونه پیش از مصرف فعال (Activate) می‌شود؟
پاپائین برای فعالیت حداکثری نیازمند باز بودن گروه تیول جایگاه فعال است؛ بنابراین باید در بافر حاوی ۱ تا ۵ میلی‌مولار ال-سیستئین و ۱ تا ۲ میلی‌مولار EDTA به مدت ۱۵ تا ۳۰ دقیقه در دمای ۳۷ درجه سانتی‌گراد فعال‌سازی شود.
پاپائین IgG را به چه قطعاتی هضم می‌کند؟
پاپائین یک مولکول کامل IgG را به سه قطعه مجزا شامل دو قطعه متصل‌شونده به آنتی‌ژن (Fab) به وزن حدود ۵۰ کیلودالتون و یک قطعه کریستالیزه‌شونده (Fc) تقسیم می‌نماید.
چگونه می‌توان واکنش آنزیمی پاپائین را متوقف کرد؟
واکنش را می‌توان با افزودن مهارکننده‌های سیستئین پروتئاز مانند E-64، یدواستامید یا با تغییر شدید pH متوقف نمود.
نقد و بررسی‌ها
هنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.