DTT سیگما-آلدریچ | دی‌تیوتریتول کد 43819 اصل
دی‌تیوتریتول (Dithiothreitol) که به اختصار DTT یا معرف کللاند (Cleland’s reagent) نامیده می‌شود، یکی از قوی‌ترین و پایدارترین عوامل احیاکننده بیوشیمیایی در بیولوژی مولکولی است. این ترکیب با دارا بودن دو گروه تیول فعال، به طور مؤثری پیوندهای دی‌سولفیدی بین‌رشته‌ای و درون‌رشته‌ای پروتئین‌ها را شکسته و مانع تشکیل اتصالات اکسیداتیو نامطلوب میان باقیمانده‌های سیستئین می‌شود. کد 43819 سیگما-آلدریچ دارای گرید بسیار خالص بیولوژی مولکولی است و به عنوان یک افزودنی حیاتی در بافرهای بارگذاری ژل الکتروفورز (Laemmli Sample Buffer)، بافرهای واکنش آنزیمی برای حفظ جایگاه فعال آنزیم‌ها و تکنیک‌های استخراج RNA با کیفیت بالا کاربرد گسترده‌ای دارد.
کاربردها
| عنوان کاربرد | توضیح کاربرد |
|---|---|
| آماده‌سازی نمونه‌های SDS-PAGE | احیای پیوندهای دی‌سولفیدی ساختار پروتئین جهت باز شدن کامل زنجیره‌های پلی‌پپتیدی. |
| تثبیت فعالیت آنزیم‌های حساس | حفظ گروه‌های سولفیدریل آزاد در جایگاه فعال آنزیم‌هایی چون ترانس‌کریپتاز معکوس و DNA پلیمراز. |
| استخراج و جداسازی RNA | غیرفعال کردن آنزیم‌های RNase از طریق شکستن پل‌های دی‌سولفیدی ساختاری آن‌ها. |
| کاهش آگلومراسیون نانوذرات متصل به تیول | جلوگیری از تجمع و اتصال پیوندهای تیولی در بیوکونژوگاسیون و شیمی اتصالات. |
ویژگی‌ها و مشخصات
| ویژگی | مقدار / مشخصات |
|---|---|
| نام محصول | Dithiothreitol (DTT) |
| برند سازنده | سیگما-آلدریچ (Sigma-Aldrich) |
| شماره کاتالوگ (Cat No.) | 43819 |
| شماره ثبت CAS | 3483-12-3 |
| فرمول شیمیایی | C4H10O2S2 |
| وزن مولکولی | 154.25 گرم بر مول |
| پتانسیل ردوکس | منفی 0.33 ولت در pH 7.0 |
| شکل ظاهری | پودر کریستالی سفید رنگ |
| دمای نگهداری | دمای 2 تا 8 درجه سانتی‌گراد در محیط خنک، خشک و تاریک |
مزایا
| عنوان مزیت | توضیح |
|---|---|
| پتانسیل احیاکنندگی برتر نسبت به مرکاپتواتانول | کارایی بالاتر در غلظت‌های کمتر به دلیل تمایل به تشکیل حلقه شش‌تایی پایدار پس از اکسیداسیون. |
| بوی نامطبوع بسیار کمتر | تجربه کاری ایمن‌تر و راحت‌تر در فضای آزمایشگاه نسبت به 2-مرکاپتواتانول. |
| گرید ویژه عاری از آلودگی فلزی | خلوص تضمین‌شده سیگما بدون تداخل یون‌های سنگین با واکنش‌های آنزیمی حساس. |
| انحلال سریع و کامل | ایجاد محلول کاملاً شفاف بدون رسوب در آب مقطر جهت تهیه استوک‌های غلیظ 1 مولار. |
سوالات متداول
چرا محلول استوک DTT باید در دمای منفی 20 منجمد شود؟
DTT در فرم محلول در تماس با اکسیژن هوا اکسید شده و توان احیاکنندگی خود را از دست می‌دهد؛ تقسیم استوک به بخش‌های کوچک و انجماد در منفی 20 مانع اکسیداسیون آن می‌شود.
غلظت مناسب DTT در بافر نمونه لودینگ SDS-PAGE چقدر است؟
معمولاً در بافر نمونه لودینگ با غلظت 50 تا 100 میلی‌مولار استفاده می‌گردد تا تمام پیوندهای دی‌سولفیدی احیا شوند.
آیا DTT با یون‌های نیکل در ستون‌های کروماتوگرافی تداخل دارد؟
بله، غلظت‌های بالاتر از 1 میلی‌مولار DTT می‌تواند یون‌های نیکل را در ستون‌های Ni-NTA احیا کرده و موجب رسوب نیکل قهوه‌ای و کاهش اتصال پروتئین شود.
نقد و بررسی‌ها
هنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.