IPTG سیگما-آلدریچ | کد I5502 القاکننده بیان ژن
ایزوپروپیل بتا-دی-1-تئوگالاکتوپیرانوزید (IPTG) با کد اختصاصی I5502 از برند معتبر سیگما-آلدریچ، یک آنالوگ غیرقابل متابولیزه لاکتوز است که به عنوان قوی‌ترین عامل القاکننده در مهندسی ژنتیک و بیوتکنولوژی کاربرد دارد. IPTG با اتصال اختصاصی به پروتئین سرکوب‌گر لاکتوز (lac repressor)، ساختار آن را تغییر داده و از مهار اپراتور جلوگیری می‌کند که در نتیجه آن بیان ژن‌های تحت کنترل پروموتر lac یا پروموترهای مشتق از آن (نظیر tac، trc و T7 RNA پلیمراز) آغاز می‌گردد. از آنجا که ساختار این ترکیب توسط آنزیم بتا-گالاکتوزیداز باکتریایی تجزیه و مصرف نمی‌شود، غلظت آن در طول پروسه بیان ثابت مانده و تولید انبوه پروتئین‌های نوترکیب را با راندمان بالا میسر می‌سازد.
کاربردها
| عنوان کاربرد | توضیح کاربرد |
|---|---|
| بیان ژن‌های نوترکیب در E. coli | القای قوی و پایدار بیان پروتئین در سیستم‌های پرکاربرد تجاری مبتنی بر وکتورهای سری pET. |
| غربالگری کلونی‌های آبی-سفید (Blue-White) | همراه با X-Gal جهت تشخیص کلونی‌های باکتریایی نوترکیب فاقد ژن گزارشگر دست‌نخورده. |
| تولید صنعتی پروتئین‌ها و آنزیم‌ها | استفاده به عنوان محرک تولید در بیوراکتورهای زیستی و فرمانتاسیون‌های آزمایشگاهی. |
| مطالعات سینتیک و فیزیولوژی باکتری | بررسی دینامیک اپران لاکتوز و فرآیندهای تنظیمی ژنتیکی پروکاریوت‌ها. |
ویژگی‌ها و مشخصات
| ویژگی | مقدار / مشخصات |
|---|---|
| نام محصول | Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) |
| برند سازنده | سیگما-آلدریچ (Sigma-Aldrich) |
| شماره کاتالوگ (Cat No.) | I5502 |
| شماره ثبت CAS | 3678-69-4 |
| فرمول شیمیایی | C9H18O5S |
| وزن مولکولی | 238.30 گرم بر مول |
| خلوص دی‌اکسان | فاقد دی‌اکسان (Dioxane-free) با درصد خلوص بالای 99% |
| حلالیت | کاملاً محلول در آب مقطر (شفاف و بی‌رنگ تا غلظت 50 میلی‌گرم در میلی‌لیتر) |
| شرایط نگهداری | دمای منفی 20 درجه سانتی‌گراد |
مزایا
| عنوان مزیت | توضیح |
|---|---|
| فاقد دی‌اکسان (Dioxane-Free) | عاری از حلال‌های آلی سمی باقی‌مانده و تضمین بالاترین راندمان زیستی بدون آسیب به سلول میزبان. |
| القاگری غیرقابل تجزیه | حفظ غلظت القایی ثابت در طول شبانه‌روز برخلاف لاکتوز طبیعی که مصرف می‌شود. |
| شفافیت فوق‌العاده محلول آبی | فیلتراسیون استریل سریع و بدون گرفتگی از فیلترهای 0.22 میکرونی. |
| پایداری در محیط آگار | امکان پخش یکنواخت روی پلیت‌های آگار حاوی آنتی‌بیوتیک برای تفکیک کلونی‌ها. |
سوالات متداول
غلظت بهینه IPTG برای القای بیان پروتئین چقدر است؟
غلظت کاری نهایی معمولاً در محدوده 0.1 تا 1 میلی‌مولار است؛ برای پروتئین‌های مستعد تشکیل Inclusion Body غلظت‌های پایین‌تر مانند 0.2 تا 0.4 میلی‌مولار توصیه می‌شود.
چگونه استوک IPTG را آماده کنیم و ماندگاری آن چقدر است؟
معمولاً استوک 100 میلی‌مولار یا 1 مولار در آب مقطر استریل تهیه، فیلتر شده و در مقادیر کم در منفی 20 درجه منجمد می‌شود که تا یک سال پایداری کامل دارد.
چرا ویژگی Dioxane-Free در IPTG اهمیت دارد؟
دی‌اکسان ماده‌ای سمی و جهش‌زا است که در برخی سنتزها باقی می‌ماند؛ گرید فاقد دی‌اکسان سیگما سلامت زیستی سلول‌ها و کیفیت پروتئین نوترکیب را تضمین می‌کند.
نقد و بررسی‌ها
هنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.