سیستم انتقال ویسترن بلات | تانک انتقال پروتئین آزمایشگاهی Western Blotting Setup
دستگاه یا ستآپ انتقال ویسترن (Western Blotting Transfer System) یکی از ملزومات اساسی در آزمایشگاههای ایمونولوژی، سلولی و مولکولی به منظور شناسایی و آنالیز پروتئینهای خاص در یک مخلوط پیچیده سلولی است. پس از تفکیک پروتئینها در ژل الکتروفورز، این سیستم با اعمال یک میدان الکتریکی یکنواخت، پروتئینهای باردار را از روی ژل به روی یک غشای پایدار (مانند نیتروسلولز یا PVDF) منتقل میکند. کیفیت و یکنواختی این انتقال، تاثیر مستقیم بر وضوح باندهای پروتئینی نهایی در مرحله آشکارسازی دارد. این تجهیزات در انواع سیستمهای انتقال مرطوب (Wet) و نیمهخشک (Semi-dry) تولید و عرضه میشوند.
کاربردها
| عنوان | توضیح |
|---|---|
| تحقیقات سرطان و بیماریها | بررسی الگوهای بیان پروتئینهای توموری و بیومارکرهای کلیدی در بافتها. |
| بیوتکنولوژی دارویی | تایید بیان پروتئینهای نوترکیب در سلولهای میزبان حین فرآیند تولید دارو. |
| آزمایشگاههای ایمونولوژی | بررسی برهمکنشهای آنتیژن-آنتیبادی و ردیابی آنتیبادیهای خاص در نمونه سرم بیمار. |
| مطالعات بیوشیمی پایه | سنجش وزن مولکولی تقریبی پروتئینها و بررسی تغییرات پس از ترجمه. |
ویژگیها و مشخصات
| ویژگی | مقدار |
|---|---|
| روش انتقال پروتئین | تانک الکتروفورز مرطوب (Wet) یا نیمهخشک (Semi-Dry) |
| جنس الکترودها | پلاتین خالص یا تیتانیوم با روکش پلاتین جهت پایداری بالا |
| تعداد کاستهای همزمان | قابلیت قرارگیری ۲ الی ۴ ژل به صورت همزمان |
| سیستم خنککننده | مجهز به قالبهای یخساز داخلی (Ice Block) جهت جلوگیری از ذوب ژل |
| سازگاری غشاها | مناسب برای انواع غشاهای Nitrocellulose و PVDF |
مزایا
| عنوان | توضیح |
|---|---|
| انتقال یکنواخت و کامل | طراحی بهینه الکترودها که باعث ایجاد میدان الکتریکی کاملاً موازی و انتقال بینقص میشود. |
| خنککاری کارآمد | سیستم انتقال حرارت عالی که مانع داغ شدن بافر و از بین رفتن ساختار پروتئینها میگردد. |
| سرعت بالای فرآیند | در مدلهای نیمهخشک، انتقال کامل پروتئینها در زمان کوتاهی (کمتر از ۳۰ دقیقه) امکانپذیر است. |
| قفلهای ایمنی کاستها | طراحی چفتها به گونهای است که فشار فیزیکی مناسبی بین ژل و غشا جهت ممانعت از ایجاد حباب برقرار میکند. |
| طول عمر بالای متریال | استفاده از پلاستیکهای مقاوم آکریلیک ضخیم که در برابر خمش و اسید بافرها تغییر شکل نمیدهند. |
سوالات متداول
فرق انتقال مرطوب (Wet) با نیمهخشک (Semi-dry) چیست؟
در روش مرطوب، کاست ژل کاملاً در بافر غوطهور است که برای پروتئینهای بزرگ عالی است، اما روش نیمهخشک از کاغذهای صافی مرطوب استفاده میکند و به بافر بسیار کمتری نیاز دارد و سریعتر است.
چرا ایجاد حباب هوا بین ژل و غشا در حین چیدمان ساندویچ انتقال خطرناک است؟
زیرا هوا عایق الکتریسیته است و در محل حبابها، جریان برقرار نشده و پروتئینی به غشا منتقل نمیشود که نتیجه آن ایجاد نقاط سفید خالی روی باند نهایی خواهد بود.
نقش غشای PVDF در مقایسه با نیتروسلولز چیست؟
غشای PVDF مقاومت فیزیکی بالاتری دارد و برای فرآیندهایی که نیاز به لایهبرداری (Stripping) و ردیابی مجدد آنتیبادی دارند بسیار مناسبتر است.
نقد و بررسیها
هنوز بررسیای ثبت نشده است.