Blasticidin S سیگما آلدریچ | آنتی‌بیوتیک انتخابی
بلاستیسیدین اس (Blasticidin S) یک آنتی‌بیوتیک نوکلئوزیدی پپتیدی مشتق از باکتری Streptomyces griseochromogenes است که به طور اختصاصی به عنوان یکی از قوی‌ترین آنتی‌بیوتیک‌های انتخابی (Selection Antibiotic) در کشت سلول‌های یوکاریوتی و پروکاریوتی کاربرد دارد. این ترکیب با تداخل در تشکیل پیوند پپتیدی در ریبوزوم، از سنتز پروتئین در هر دو نوع سلول ممانعت به عمل می‌آورد.
در پروژه‌های مهندسی ژنتیک و بیولوژی سلولی، از ژن‌های مقاومت bsr یا bsd برای غربالگری کلونی‌های ترانسفکت‌شده استفاده می‌شود. سلول‌هایی که این ژن را با موفقیت بیان کنند، با تولید آنزیم دآمیناز اختصاصی، بلاستیسیدین را خنثی می‌کنند. محصول شرکت سیگما آلدریچ به فرم هیدروکلراید و با حلالیت بسیار بالا در آب عرضه می‌شود تا سرعت ایجاد رده‌های سلولی پایدار را به حداکثر برساند.
کاربردهای کلیدی Blasticidin S
| حوزه آزمایشی | فرآیند ژنتیکی | نقش مولکولی آنتی‌بیوتیک |
|---|---|---|
| کشت سلول پستانداران | انتخاب رده‌های ترانسفکت‌شده پایدار | حذف کامل سلول‌های غیرترانسفکت‌شده در بازه زمانی بسیار کوتاه (کمتر از ۷ روز) |
| کلونینگ و ژنتیک باکتریایی | غربالگری کلونی‌های باکتری E. coli | انتخاب و تفکیک سازه‌های پلاسمیدی حاوی ژن مقاومت bsr |
| ویرایش ژنوم با CRISPR | تثبیت سلول‌های ویرایش‌شده | به‌کارگیری به عنوان مارکر انتخاب مثبت در وکتورهای لنتی‌ویروسی و رتروویروسی |
مشخصات فنی و استانداردهای فیزیکی
| پارامتر فنی | مقدار / شرح |
|---|---|
| نام تولیدکننده | سیگما آلدریچ (Sigma-Aldrich) |
| کد بین‌المللی CAS | 3513-03-9 |
| فرمول بسته | C17H26N8O5 · HCl |
| وزن مولکولی | ۴۵۸.۹۰ گرم بر مول |
| حلالیت در آب | بسیار محلول در آب مقطر استریل (بیش از ۳۰ میلی‌گرم در میلی‌لیتر) |
| دمای نگهداری استاندارد | دمای منفی ۲۰ درجه سانتی‌گراد |
مزایای کلیدی بلاستیسیدین اس سیگما
| مزیت کاربردی | برتری در مقایسه با سایر مارکرها |
|---|---|
| سرعت مرگ سلولی فوق‌العاده | کشتن کامل سلول‌های فاقد مقاومت ظرف ۳ تا ۶ روز برخلاف G418 که به دو هفته زمان نیاز دارد |
| غلظت انتخابی بسیار کم | ایجاد گزینش موثر در غلظت‌های اندک (معمولاً ۲ تا ۱۰ میکروگرم بر میلی‌لیتر) |
| قابلیت استفاده دوگانه | کارایی یکسان بر روی باکتری‌ها، مخمرها و انواع سلول‌های جانوری و گیاهی |
پرسش‌های متداول درباره Blasticidin S
غلظت مناسب برای سلول‌های پستانداران چگونه تعیین می‌شود؟
قبل از غربالگری باید منحنی کشتن (Kill curve) رسم شود؛ اما غلظت بهینه معمولاً در بازه ۲ تا ۱۰ میکروگرم در میلی‌لیتر برای رده‌های معمول آزمایشگاهی قرار دارد.
چگونه محلول را استریل نماییم؟
پودر را در آب مقطر دیونیزه حل کرده و سپس با فیلتر سرسرنگی ۰.۲۲ میکرون با اتصال کم به پروتئین (مانند PES یا PVDF) فیلتر استریل نمایید.
آیا به دفعات یخ زدن و آب شدن حساس است؟
بله، برای حفظ فعالیت پایدار بیولوژیکی، محلول را در حجم‌های مشخص Aliquot کرده و از فریز-دیسفریز مکرر خودداری نمایید.
نقد و بررسی‌ها
هنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.