کوماسی بریلیانت بلو R-250 سیگما B7920 اصل
رنگ کوماسی بریلیانت بلو R-250 (Coomassie Brilliant Blue R-250) با کد کاتالوگ B7920 سیگما-آلدریچ، متداول‌ترین و معتبرترین رنگ‌آمیزی شیمیایی جهت مشاهده و اندازه‌گیری کمی پروتئین‌ها در ژل‌های الکتروفورز SDS-PAGE و ژل‌های طبیعی (Native PAGE) است. این رنگ آنیونی با اتصال غیرکووالانسی به ریشه‌های اساسی آمینواسیدها (به ویژه آرژنین، لایزین و هیستیدین) و برهم‌کنش با نیروهای واندروالس، باندهای پروتئینی را با حساسیت بالا (تا حد چند نانوگرم پروتئین) به رنگ آبی پررنگ نمایان می‌سازد.
کاربردها
| عنوان | توضیح |
|---|---|
| رنگ‌آمیزی ژل‌های پلی‌آکریل‌آمید (SDS-PAGE) | ردیابی و مشاهده وزن مولکولی باندهای پروتئینی پس از اتمام الکتروفورز |
| سنجش کمی پروتئین در ژل | دانسیومتری و آنالیز شدت روشنایی باندها جهت ارزیابی بیان پروتئین |
| تعیین خلوص نمونه‌های تخلیص‌شده | بررسی کیفیت فرآیند خالص‌سازی پروتئین نوترکیب و تشخیص باندهای ناخالصی |
| آماده‌سازی نمونه‌ها برای اسپکترومتری جرمی | برش باندهای رنگ‌آمیزی‌شده جهت هضم درون ژلی و آنالیز Mass Spectrometry |
ویژگی‌ها و مشخصات
| ویژگی | مقدار |
|---|---|
| نام محصول | Coomassie Brilliant Blue R 250 |
| برند سازنده | Sigma-Aldrich |
| کد کاتالوگ | B7920 |
| شماره CAS | 6104-59-2 |
| فرمول مولکولی | C45H44N3NaO7S2 |
| وزن مولکولی | ۸۲۵.۹۷ گرم بر مول |
| حداکثر طول موج جذب (λmax) | حدود ۵۸۷ تا ۵۹۲ نانومتر در حلال متانول |
| حساسیت ردیابی | شناسایی حدود ۵۰ تا ۱۰۰ نانوگرم پروتئین در هر باند |
| دمای نگهداری | دمای اتاق (۱۵ تا ۲۵ درجه سانتی‌گراد) |
مزایا
| عنوان | توضیح |
|---|---|
| حساسیت و وضوح عالی باندها | ایجاد باندهای شارپ و واضح آبی‌رنگ با کمترین زمینه و خطای چشمی |
| رنگ‌بری آسان (Destaining) | خروج سریع رنگ اضافی از پس‌زمینه ژل با محلول استیک اسید-متانول |
| سازگاری کامل با تست‌های جرمی | امکان استخراج پپتیدها برای توالی‌یابی بدون تغییر شیمیایی پایدار در پروتئین |
| فرمولاسیون یکدست و خالص | تولید شده با شاخص خلوص رنگی بالا بدون ذرات نامحلول و لکه روی ژل |
سوالات متداول
تفاوت کوماسی R-250 با کوماسی G-250 چیست؟
حرف R مخفف Reddish (تمایل به قرمز) و G مخفف Greenish (تمایل به سبز) است؛ نوع R-250 برای رنگ‌آمیزی عمومی ژل‌های الکتروفورز و نوع G-250 برای سنجش غلظت پروتئین برادفورد (Bradford) به کار می‌رود.
محلول رنگ‌آمیزی کوماسی R-250 چگونه ساخته می‌شود؟
ترکیب استاندارد شامل ۰.۱٪ پودر کوماسی R-250، ۴۰٪ متانول، ۱۰٪ اسید استیک گلاسیال و ۵۰٪ آب مقطر است.
رنگ‌آمیزی ژل با کوماسی R-250 چقدر زمان می‌برد؟
رنگ‌آمیزی معمولاً بین ۳۰ تا ۶۰ دقیقه در حال شیکینگ ملایم طول می‌کشد و پس از آن مرحله رنگ‌بری (Destaining) به مدت ۱ تا چند ساعت انجام می‌گردد.
نقد و بررسی‌ها
هنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.