آنزیم لیزوزیم سیگما L6876 | پودر لیوفیلیزه سفیده تخم‌مرغ

 

آنزیم لیزوزیم (Lysozyme) استخراج شده از سفیده تخم‌مرغ کد L6876 سیگما-آلدریچ، یک گلیکوزید هیدرولاز اختصاصی است که پیوندهای بتای 1 به 4 میان N-استیل مورامیک اسید و N-استیل گلوکوزامین در پپتیدوگلیکان دیواره باکتریایی را هیدرولیز می‌کند. این فعالیت کاتالیتیکی کارآمد سبب سست شدن و فروپاشی کامل دیواره سلول‌های باکتریایی (به ویژه گرم مثبت‌ها و همچنین گرم منفی‌ها در حضور EDTA) می‌گردد. در آزمایشگاه‌های ژنتیک و بیوشیمی، لیزوزیم به عنوان جزئی جدایی‌ناپذیر در پروتکل‌های لیز سلولی ملایم، تخلیص پروتئین‌های نوترکیب بدون آسیب حرارتی یا مکانیکی و استخراج DNA پلاسمیدی و کروموزومی مورد بهره‌برداری قرار می‌گیرد.

کاربردها

عنوان کاربرد	توضیح کاربرد
لیز آنزیمی دیواره باکتریایی	تخریب ایمن دیواره باکتری‌های E. coli و باسیلوس جهت استخراج سالم محتویات سلولی.
استخراج پلاسمید و اسیدهای نوکلئیک	بهبود راندمان تخلیص وکتورهای نوترکیب در پروتکل‌های آلکالاین لیزیس دستی و کیت‌ها.
تخلیص پروتئین‌های دست‌نخورده	آزادسازی پروتئین‌های سیتوپلاسمی و پری‌پلاسمیک بدون نیاز به سونیکاسیون‌های شدید.
مطالعات ساختاری کاتالیز آنزیمی	استفاده به عنوان پروتئین مدل در پژوهش‌های کریستالوگرافی اشعه X و تاخوردگی پروتئین.

ویژگی‌ها و مشخصات

ویژگی	مقدار / مشخصات
نام محصول	Lysozyme from chicken egg white
برند سازنده	سیگما-آلدریچ (Sigma-Aldrich)
شماره کاتالوگ (Cat No.)	L6876
شماره ثبت CAS	12650-88-3
فعالیت ویژه آنزیمی	حداقل 40,000 تا 50,000 واحد در میلی‌گرم پودر
وزن مولکولی	تقریباً 14.3 کیلودالتون
حلالیت	کاملاً محلول در آب مقطر یا بافر تریس (تا 10 میلی‌گرم در میلی‌لیتر)
pH بهینه فعالیت	دامنه 6.0 تا 7.0
شرایط دمایی انبارداری	دمای منفی 20 درجه سانتی‌گراد

مزایا

عنوان مزیت	توضیح
فعالیت ویژه استاندارد و تأییدشده	سرعت کاتالیتیکی یکنواخت در هضم دیواره باکتریایی سویه‌های استاندارد میکروکوکوس.
عدم تخریب اسیدهای نوکلئیک	عاری از آلودگی‌های غیرمجاز DNase و RNase جهت حفظ یکپارچگی ژنوم.
جایگزین روش‌های فیزیکی خشن	حذف آسیب‌های برشی (Shearing) به DNA در مقایسه با سونیکاتور و پرش فشرده هوموسل.
پایداری فرم کریستالی	حفظ کامل فعالیت کاتالیتیک طی دوره‌های نگهداری بلندمدت در صورت حفظ زنجیره دمایی.

سوالات متداول

چرا در پروتکل‌های لیز باکتری‌های گرم منفی همراه با لیزوزیم از EDTA استفاده می‌شود؟

باکتری‌های گرم منفی دارای غشای خارجی لیپوپلی‌ساکاریدی هستند؛ EDTA با کلاته کردن یون‌های منیزیم غشای خارجی را ناپایدار کرده و راه ورود لیزوزیم به پپتیدوگلیکان را هموار می‌سازد.

غلظت کاری متداول لیزوزیم چقدر است؟

غلظت کاری معمول در بافرهای لیز سلولی بسته به تراکم باکتری بین 0.2 تا 1 میلی‌گرم در میلی‌لیتر است.

آیا محلول استوک آماده شده پایدار است؟

محلول استوک در بافر تریس در دمای منفی 20 درجه پایدار است؛ البته بهتر است برای آزمایش‌های بسیار دقیق محلول تازه تهیه شود.