آنزیم HRP هورس رادیش پراکسیداز سیگما P6782 اصل

 

آنزیم هورس رادیش پراکسیداز (Horseradish Peroxidase – HRP) تیپ VI-A کد P6782 سیگما-آلدریچ، یک گلیکوپروتئین حاوی هم است که اکسیداسیون سوبستراهای مختلف کروموژنیک، فلوروژنیک و لومینوسنت را با استفاده از پراکسید هیدروژن کاتالیز می‌کند. این آنزیم پرکاربردترین برچسب تشخیصی در تکنیک‌های الایزا (ELISA)، وسترن بلاتینگ (Western Blotting) و ایمونوهیستوشیمی (IHC) محسوب می‌شود. پایداری ساختاری بالا، اندازه بهینه مولکولی و امکان اتصال آسان به آنتی‌بادی‌ها یا استرپتاویدین بدون افت فعالیت کاتالیتیکی، کد P6782 سیگما را به استانداردی طلایی برای طراحی کیت‌های فوق حساس آزمایشگاهی و تحقیقاتی تبدیل کرده است.

کاربردها

عنوان کاربرد	توضیح کاربرد
کونژوگاسیون با آنتی‌بادی‌ها	اتصال کووالانسی به آنتی‌بادی‌های ثانویه جهت ردیابی ایمونولوژیک آنتی‌ژن‌ها.
سنجش‌های کمی الایزا (ELISA)	تولید سیگنال رنگی با استفاده از سوبستراهای TMB یا ABTS جهت خوانش در طول موج اختصاصی.
ردیابی پروتئین در وسترن بلات	تولید نور در حضور معرف‌های کمی‌لومینسانس (ECL) جهت آشکارسازی روی فیلم رادیوگرافی یا ژل‌داک.
بیوسنسورهای آنزیمی گلوکز و پراکسید	تثبیت بر روی الکترودهای تشخیصی برای اندازه‌گیری دقیق متابولیت‌های بیولوژیکی.

ویژگی‌ها و مشخصات

ویژگی	مقدار / مشخصات
نام محصول	Horseradish Peroxidase (Type VI-A)
برند سازنده	سیگما-آلدریچ (Sigma-Aldrich)
شماره کاتالوگ (Cat No.)	P6782
شماره ثبت CAS	9003-99-0
فعالیت ویژه آنزیمی	بیش از 250 تا 330 واحد در میلی‌گرم پودر (ABTS units)
نسبت خلوص هم (RZ – Reinheitszahl)	حداقل 3.0 (A403 / A275)
وزن مولکولی	تقریباً 44 کیلودالتون
شکل فیزیکی	پودر لیوفیلیزه به رنگ قهوه‌ای مایل به قرمز
دمای نگهداری	دمای منفی 20 درجه سانتی‌گراد در محیط کاملاً خشک و محافظت‌شده از رطوبت

مزایا

عنوان مزیت	توضیح
خلوص آنزیمی بالا بر اساس شاخص RZ	حداقل نسبت RZ برابر 3 نشان‌دهنده نبود پروتئین‌های غیرفعال و بازدهی حداکثری کاتالیتیک است.
فعالیت کاتالیتیک سریع و خطی	توسعه رنگ با شیب یکنواخت و ایجاد دامنه دینامیکی گسترده در رسم منحنی‌های کمی غلظت.
پایداری فوق‌العاده در فرم لیوفیلیزه	حفظ ساختار سوم و عدم تغییر در راندمان پیوندی طی انبارش صحیح فریزری.
سازگاری گسترده با سوبستراهای مختلف	پشتیبانی بهینه از واکنش با TMB، OPD، DAB و سوبستراهای فوق حساس کمی‌لومینسانس.

سوالات متداول

مفهوم شاخص RZ در آنزیم HRP چیست؟

شاخص Reinheitszahl نسبت جذب نوری هم در 403 نانومتر به پروتئین تام در 275 نانومتر است که مقادیر 3.0 یا بالاتر نشان‌دهنده خلوص عالی برای کونژوگاسیون است.

چرا نباید از سدیم آزید در بافرهای حاوی HRP استفاده کرد؟

سدیم آزید مهارکننده قوی و برگشت‌ناپذیر مرکز فعال هم در آنزیم پراکسیداز است و موجب از بین رفتن کامل سیگنال واکنشی می‌شود.

بهترین شرایط نگهداری محلول HRP پس از حل کردن چیست؟

توصیه می‌شود پودر در بافر فسفات خنثی حل شده و به صورت بخش‌بندی شده (Aliquot) در منفی 20 نگهداری شود و از چرخه انجماد و ذوب مجدد مکرر پرهیز گردد.