پروتئین A آگارز سیگما کد P2545 گرید آزمایشگاهی

 

پروتئین A آگارز سیگما آلدریچ با کد کاتالوگ P2545 یکی از مطمئن‌ترین رزین‌های بیواستخراج جهت رسوب‌دهی ایمنی (Immunoprecipitation) و تخلیص مقیاس‌بالای ایمونوگلوبولین‌های نوع G (IgG) است. در این محصول، پروتئین نوترکیب A استخراج شده از استافیلوکوکوس اورئوس به شیوه کووالانسی روی بیدهای آگارز متخلخل متصل گردیده است به طوری که سایت اتصالی به ناحیه Fc آنتی‌بادی به طور کامل در دسترس باقی می‌ماند. ظرفیت پیوندزنی بالا، هدررفت ناچیز در حین شستشو و پایداری در محدوده گسترده اسیدیته، این رزین را به انتخابی استاندارد برای جداسازی ایزوتیپ‌های آنتی‌بادی IgG از سرم خون و عصاره کشت تبدیل نموده است.

کاربردها

عنوان	توضیح
تکنیک ایمونوپرسیپیتاسیون (IP / Co-IP)	جداسازی پروتئین‌های خاص یا کمپلکس‌های پروتئینی از لیزات سلولی توسط آنتی‌بادی
تخلیص آنتی‌بادی‌های مونوکلونال و پلی‌کلونال	جداسازی ایمونوگلوبولین‌های IgG انسانی، خرگوش و موش از سرم یا سوپرمحیط کشت
ایمونواسی‌های کروماتین (ChIP)	جداسازی فاکتورهای رونویسی متصل به توالی‌های DNA در تحقیقات اپی‌ژنتیک
حذف تداخلات IgG از سرم	آماده‌سازی نمونه‌های بالینی به منظور کاهش تداخل آنتی‌بادی‌های غیرهدف در سنجش‌ها

ویژگی‌ها و مشخصات

ویژگی	مقدار
نام محصول	Protein A–Agarose from Staphylococcus aureus
برند سازنده	Sigma-Aldrich
کد کاتالوگ	P2545
ماتریکس پشتیبان	ژل آگارز اتصالات متقاطع با تخلخل ۴ درصد
ظرفیت پیوند آنتی‌بادی	حداقل ۱۰ الی ۱۵ میلی‌گرم پروتئین IgG انسانی در هر میلی‌لیتر ژل
پایداری اسیدیته (pH)	محدوده ۳ الی ۱۰
فرم تحویل	سوسپانسیون ۵۰ درصد در بافر حاوی نگه‌دارنده سدیم آزید
اندازه ذرات بید	۴۵ الی ۱۶۵ میکرومتر
دمای مجاز انبارش	دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی‌گراد (هرگز نباید منجمد شود)

مزایا

عنوان	توضیح
ظرفیت اتصالی فوق‌العاده بالا	امکان تخلیص مقادیر قابل توجه IgG با مقادیر کمتری از حجم رزین مصرفی
اتصال کووالانسی مستحکم ماتریکس	جلوگیری از کنده شدن پروتئین A و آلوده‌سازی الیوت حاصل در فرآیند شستشو
سرعت جریان عالی	تخلخل ایده‌آل بیدهای آگارز مانع از انسداد ستون در کروماتوگرافی ثقلی یا ستونی می‌گردد.
امکان احیا و استفاده مجدد	رزین پس از مراحل شستشو با بافر گلایسین به آسانی بازسازی و چندباره مصرف می‌شود.

سوالات متداول

آیا پروتئین A به تمامی ایزوتیپ‌های آنتی‌بادی IgG متصل می‌شود؟

پروتئین A تمایل بسیار بالایی به IgG1، IgG2 و IgG4 انسان و IgG پلی‌کلونال خرگوش دارد، اما تمایل آن به IgG3 انسانی یا IgG1 موش متوسط است که در آن موارد پروتئین G ترجیح داده می‌شود.

چگونه آنتی‌بادی‌های متصل از پروتئین A آگارز جدا (Elute) می‌شوند؟

بهترین روش استفاده از بافر اسیدی مانند بافر گلایسین ۰.۱ مولار با pH ۲.۵ تا ۳.۰ و جمع‌آوری فوری نمونه در میکروتیوب‌های حاوی بافر خنثی‌ساز Tris با pH ۹.۰ است.

چرا فریز کردن پروتئین A آگارز ممنوع است؟

انجماد ساختار شبکه هیدراته آگارز را تخریب کرده و باعث خرد شدن دانه‌های ژل و کاهش شدید ظرفیت اتصال می‌گردد.