پروپیدیوم یدید PI سیگما (P4170) – رنگ DNA فلورسنت، فلوسایتومتری
پروپیدیوم یدید (Propidium Iodide یا PI) یک رنگ فلورسنت قوی است که به طور گسترده برای رنگآمیزی اسیدهای نوکلئیک (DNA و RNA) در سلولها و بافتها استفاده میشود. این رنگ قادر به عبور از غشای سلولهای زنده نیست، اما به راحتی وارد سلولهای مرده یا دارای غشای آسیبدیده میشود و پس از اتصال به DNA، فلورسانس قرمز روشن ساطع میکند. این ویژگی، PI را به ابزاری ایدهآل برای سنجش زندهمانی سلولی، تجزیه و تحلیل چرخه سلولی (Cell Cycle Analysis) با استفاده از فلوسایتومتری و میکروسکوپ فلورسنت، و همچنین بررسی آپوپتوز تبدیل کرده است.
کاربردها
| عنوان | توضیح |
|---|---|
| رنگآمیزی اسید نوکلئیک | اتصال به DNA و RNA و ایجاد فلورسانس قرمز. |
| سنجش چرخه سلولی | تعیین فازهای مختلف چرخه سلولی (G1، S، G2/M) با فلوسایتومتری. |
| مطالعات آپوپتوز | شناسایی سلولهای در حال مرگ یا آسیبدیده در فرآیند آپوپتوز. |
| فلوسایتومتری | آنالیز کمی و کیفی جمعیتهای سلولی بر اساس محتوای DNA. |
| میکروسکوپ فلورسنت | تصویربرداری از هسته سلولها و ساختارهای DNA. |
| ارزیابی زندهمانی سلولی | تمایز سلولهای مرده از سلولهای زنده در کنار رنگهایی مانند CFDA. |
ویژگیها و مشخصات
| ویژگی | مقدار |
|---|---|
| نام محصول | پروپیدیوم یدید / PI |
| نام تجاری | Sigma-Aldrich |
| کد کاتالوگ | P4170 |
| شماره CAS | 25535-16-4 |
| شکل ظاهری | پودر قرمز تیره |
| وزن مولکولی | 668.4 g/mol |
| طول موج تحریک (Excitation) | حدود ۵۳۵ نانومتر |
| طول موج نشر (Emission) | حدود ۶۱۷ نانومتر (قرمز) |
| حلالیت | محلول در آب و بافرهای آبی |
مزایا
| عنوان | توضیح |
|---|---|
| فلورسانس قوی | ایجاد سیگنال فلورسنت قرمز واضح و قابل تشخیص. |
| انتخابپذیری سلولی | نفوذ ناپذیری به سلولهای زنده و رنگآمیزی انتخابی سلولهای مرده. |
| کاربرد گسترده | قابل استفاده در فلوسایتومتری، میکروسکوپ فلورسنت و مطالعات DNA. |
| هزینه مقرون به صرفه | یکی از روشهای اقتصادی برای ارزیابی سلامت سلول. |
سوالات متداول
آیا پروپیدیوم یدید (PI) برای سلولهای زنده سمی است؟
PI به خودی خود سمی محسوب نمیشود، اما به دلیل تواناییاش در اتصال به DNA، نباید سلولهای زنده را برای مدت طولانی در معرض آن قرار داد، زیرا ممکن است در فرآیندهای سلولی اختلال ایجاد کند. کاربرد اصلی آن شناسایی سلولهای مرده است.
چه تفاوتی بین PI و DAPI وجود دارد؟
PI و DAPI هر دو رنگهایی هستند که به DNA متصل میشوند، اما PI فقط وارد سلولهای مرده میشود و فلورسانس قرمز دارد، در حالی که DAPI وارد سلولهای زنده و مرده میشود و فلورسانس آبی دارد. این تفاوت آنها را برای کاربردهای مختلف مناسب میسازد.
چگونه میتوان از PI برای سنجش چرخه سلولی استفاده کرد؟
در فلوسایتومتری، سلولها ابتدا با PI رنگآمیزی میشوند. سپس دستگاه فلوسایتومتر شدت فلورسانس هر سلول را اندازهگیری میکند که متناسب با میزان DNA آن است. این دادهها برای تفکیک سلولها در فازهای G1، S و G2/M چرخه سلولی استفاده میشوند.
نقد و بررسیها
هنوز بررسیای ثبت نشده است.