رنگ فلورسنت FITC سیگما کد F7250 اصل آلمان
فلورسئین ایزوتیوسیانات سیگما آلدریچ (FITC Isomer I) با کد کاتالوگ F7250 یکی از معروف‌ترین و کارآمدترین شناساگرهای فلورسنت در حوزه ایمونوشیمی و زیست‌شناسی سلولی است. این معرف با گروه عاملی ایزوتیوسیانات فعال، به راحتی با گروه‌های آمین اولیه در پروتئین‌ها، پپتیدها و آنتی‌بادی‌ها واکنش داده و اتصالی پایدار از نوع تیوکربامید تشکیل می‌دهد. ترکیب حاصله دارای جذب در طول موج ۴۹۵ نانومتر و نشر در ۵۲۵ نانومتر با درخشش سبز فسفری تند است. پایداری ساختار، راندمان کوپلینگ بالا و سازگاری با سیستم‌های آشکارسازی استاندارد، اف‌آی‌تی‌سی را به یک استاندارد جهانی در پروب‌های تشخیصی تبدیل کرده است.
کاربردها
| عنوان | توضیح |
|---|---|
| کونژوگاسیون با آنتی‌بادی‌ها | تولید آنتی‌بادی‌های نشاندار اولیه و ثانویه در تست‌های ایمونوهیستوشیمی و ایمونوفلورسانس |
| فلوسایتومتری (FACS) | شناسایی گیرنده‌های سطحی سلول و آنالیز فنوتیپی جمعیت‌های خونی و توموری |
| میکروسکوپ کانفوکال | تصویربرداری درون‌سلولی با کنتراست بالا و ردیابی بیومولکول‌ها در سلول زنده یا تثبیت‌شده |
| سنجش‌های مبتنی بر فلورسانس (FRET) | مطالعه برهم‌کنش‌های پروتئین-پروتئین و برهم‌کنش‌های بین‌مولکولی در بیوفیزیک |
ویژگی‌ها و مشخصات
| ویژگی | مقدار |
|---|---|
| نام محصول | Fluorescein 5-isothiocyanate (FITC Isomer I) |
| برند سازنده | Sigma-Aldrich |
| کد کاتالوگ | F7250 |
| شماره ثبت مواد (CAS Number) | 3326-32-7 |
| فرمول مولکولی | C21H11NO5S |
| وزن مولکولی | ۳۸۹.۳۸ گرم بر مول |
| طول موج بیشینه جذب (λmax) | ۴۹۰ الی ۴۹۵ نانومتر |
| طول موج بیشینه نشر (λem) | ۵۲۵ الی ۵۳۰ نانومتر |
| خلوص بر اساس HPLC | بیشتر از ۹۰ درصد (ایزومر خالص I) |
| شرایط نگهداری | دمای منفی ۲۰ درجه سانتی‌گراد در محیط کاملاً تاریک و خشک |
مزایا
| عنوان | توضیح |
|---|---|
| حساسیت و درخشش فوق‌العاده | ضریب خاموشی بالا و بازده کوانتومی مناسب جهت آشکارسازی مقادیر بسیار اندک آنتی‌ژن |
| انعطاف‌پذیری و پیوند کووالانسی مقاوم | ایجاد پیوند بسیار محکم تیوکربامید با پپتیدها بدون کاهش تمایل اتصالی آنتی‌بادی |
| سازگاری کامل با دستگاه‌ها | انطباق ایده‌آل با لیزرهای آرگون آبی (۴۸۸ نانومتر) متداول در دستگاه‌های فلوسایتومتری |
| خلوص ایزومری دقیق | تک‌ایزومر بودن محصول مانع از ایجاد تداخلات استریک و ناهمگونی در کونژوگاسیون می‌گردد. |
سوالات متداول
بهترین شرایط پیوند FITC به آنتی‌بادی چه محدوده‌ای از pH است؟
واکنش کونژوگاسیون ایزوتیوسیانات با گروه‌های آمینی معمولاً در بافر بی‌کربنات با بازه اسیدیته بین ۹.۰ تا ۹.۵ در دمای اتاق یا ۴ درجه بیشترین بازدهی را دارد.
آیا ماده FITC به نور حساس است؟
بله، این پودر و محلول‌های آن بسیار به نور حساس هستند و باید همواره در ظروف تیره پوشانده شده با فویل آلومینیوم و در دمای منفی ۲۰ درجه نگهداری شوند.
پس از انجام کونژوگاسیون، فلورسئین اضافی چگونه از پروتئین جدا می‌شود؟
معمولاً با استفاده از ستون‌های نمک‌زدایی ژل فیلتراسیون (مانند Sephadex G-25) یا دیالیز علیه بافر PBS می‌توان رنگ‌های جفت‌نشده را به سرعت خارج نمود.
نقد و بررسی‌ها
هنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.