کوماسی بلو G-250 سیگما | کد B0770 گرید برادفورد
رنگ کوماسی بریلیانت بلو G-250 (Coomassie Brilliant Blue G-250) محصول سیگما-آلدریچ، یکی از اساسی‌ترین شناساگرهای رنگ‌سنجی جهت رنگ‌آمیزی پروتئین‌ها پس از تفکیک الکتروفورزی و همچنین پایه اصلی سنجش معروف برادفورد (Bradford Assay) به شمار می‌رود. ساختار این رنگ در محیط‌های اسیدی با رزیدوهای پایه‌ای اسیدهای آمینه (به‌ویژه آرژنین، لیزین و هیستیدین) و زنجیره‌های آروماتیک پیوند برقرار می‌کند که منجر به جابجایی طیفی بیشینه جذب نوری از 465 به 595 نانومتر می‌شود. حساسیت تشخیصی عالی و تکرارپذیری مطلوب، کد B0770 را به یک ترکیب آزمایشگاهی مطمئن در مراکز بیوتکنولوژی و آنالیز پروتئومیکس تبدیل نموده است.
کاربردها
| عنوان کاربرد | توضیح کاربرد |
|---|---|
| سنجش کمی غلظت پروتئین (Bradford) | ساخت معرف برادفورد برای اندازه‌گیری سریع، حساس و دقیق پروتئین‌های محلول. |
| رنگ‌آمیزی ژل‌های SDS-PAGE و Native | آشکارسازی باندهای پروتئینی بر روی ژل پلی‌اکریل‌آمید بدون ایجاد پس‌زمینه مزاحم. |
| الکتروفورز ژل ژنتیکی و پروتئومیکس دو بعدی | پایش و برش لکه‌های پروتئینی برای آنالیزهای بعدی طیف‌سنجی جرمی (Mass Spectrometry). |
| پایش فرآیندهای خالص‌سازی بیولوژیکی | کنترل سریع خروجی ستون‌های کروماتوگرافی به کمک آزمون‌های سریع نقطه‌ای. |
ویژگی‌ها و مشخصات
| ویژگی | مقدار / مشخصات |
|---|---|
| نام محصول | Coomassie Brilliant Blue G-250 |
| برند سازنده | سیگما-آلدریچ (Sigma-Aldrich) |
| شماره کاتالوگ (Cat No.) | B0770 |
| شماره ثبت CAS | 6104-58-1 |
| فرمول شیمیایی | C47H48N3NaO7S2 |
| وزن مولکولی | 854.02 گرم بر مول |
| طیف جذب نوری معرف برادفورد | جابجایی از 465 نانومتر به 595 نانومتر در کمپلکس پروتئینی |
| شکل ظاهری | پودر به رنگ بنفش تیره مایل به قهوه‌ای |
| شرایط انبارداری | دمای اتاق (15 تا 25 درجه سانتی‌گراد) در محیط خشک و خنک |
مزایا
| عنوان مزیت | توضیح |
|---|---|
| رنگ‌بری فوق‌العاده سریع ژل | ایجاد تمایز سریع باندهای پروتئینی بدون نیاز مکرر به حلال‌های گران‌قیمت رنگ‌بر. |
| خطیت عالی در روش برادفورد | همبستگی خطی دقیق در دامنه غلظتی میکروگرم برای رسم منحنی‌های استاندارد BSA. |
| حساسیت بالا در مقیاس نانوگرم | قابلیت ردیابی باندهای پروتئینی بسیار رقیق تا حد 8 الی 10 نانوگرم در ژل. |
| تطابق با طیف‌سنجی جرمی (MS-compatible) | امکان استخراج هضم تریپسینی پروتئین از ژل برای آنالیزهای پروتئومیکس بدون تخریب زنجیره. |
سوالات متداول
تفاوت اصلی میان کوماسی G-250 و R-250 در چیست؟
حرف G نشان‌دهنده ته‌رنگ متمایل به سبز (Greenish) و R نشان‌دهنده متمایل به قرمز (Reddish) است؛ فرم G-250 به دلیل حساسیت و پاسخ طیفی در ساخت معرف برادفورد استفاده می‌شود.
چگونه معرف برادفورد را با پودر G-250 تهیه می‌کنند؟
پودر G-250 در اتانول حل شده، با اسید فسفوریک 85 درصد مخلوط گشته و سپس با آب مقطر رقیق و فیلتر می‌شود تا رنگ قهوه‌ای-قرمز شفاف حاصل گردد.
آیا رنگ‌آمیزی با G-250 برای پروتئین‌های متصل به غشا نیز مناسب است؟
بله، در الکتروفورز Blue Native PAGE برای نگهداری بار سطحی و جداسازی کمپلکس‌های غشایی دست‌نخورده کاربرد اختصاصی دارد.
نقد و بررسی‌ها
هنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.