کوماسی بلو G-250 سیگما | کد B0770 گرید برادفورد

 

رنگ کوماسی بریلیانت بلو G-250 (Coomassie Brilliant Blue G-250) محصول سیگما-آلدریچ، یکی از اساسی‌ترین شناساگرهای رنگ‌سنجی جهت رنگ‌آمیزی پروتئین‌ها پس از تفکیک الکتروفورزی و همچنین پایه اصلی سنجش معروف برادفورد (Bradford Assay) به شمار می‌رود. ساختار این رنگ در محیط‌های اسیدی با رزیدوهای پایه‌ای اسیدهای آمینه (به‌ویژه آرژنین، لیزین و هیستیدین) و زنجیره‌های آروماتیک پیوند برقرار می‌کند که منجر به جابجایی طیفی بیشینه جذب نوری از 465 به 595 نانومتر می‌شود. حساسیت تشخیصی عالی و تکرارپذیری مطلوب، کد B0770 را به یک ترکیب آزمایشگاهی مطمئن در مراکز بیوتکنولوژی و آنالیز پروتئومیکس تبدیل نموده است.

کاربردها

عنوان کاربرد	توضیح کاربرد
سنجش کمی غلظت پروتئین (Bradford)	ساخت معرف برادفورد برای اندازه‌گیری سریع، حساس و دقیق پروتئین‌های محلول.
رنگ‌آمیزی ژل‌های SDS-PAGE و Native	آشکارسازی باندهای پروتئینی بر روی ژل پلی‌اکریل‌آمید بدون ایجاد پس‌زمینه مزاحم.
الکتروفورز ژل ژنتیکی و پروتئومیکس دو بعدی	پایش و برش لکه‌های پروتئینی برای آنالیزهای بعدی طیف‌سنجی جرمی (Mass Spectrometry).
پایش فرآیندهای خالص‌سازی بیولوژیکی	کنترل سریع خروجی ستون‌های کروماتوگرافی به کمک آزمون‌های سریع نقطه‌ای.

ویژگی‌ها و مشخصات

ویژگی	مقدار / مشخصات
نام محصول	Coomassie Brilliant Blue G-250
برند سازنده	سیگما-آلدریچ (Sigma-Aldrich)
شماره کاتالوگ (Cat No.)	B0770
شماره ثبت CAS	6104-58-1
فرمول شیمیایی	C47H48N3NaO7S2
وزن مولکولی	854.02 گرم بر مول
طیف جذب نوری معرف برادفورد	جابجایی از 465 نانومتر به 595 نانومتر در کمپلکس پروتئینی
شکل ظاهری	پودر به رنگ بنفش تیره مایل به قهوه‌ای
شرایط انبارداری	دمای اتاق (15 تا 25 درجه سانتی‌گراد) در محیط خشک و خنک

مزایا

عنوان مزیت	توضیح
رنگ‌بری فوق‌العاده سریع ژل	ایجاد تمایز سریع باندهای پروتئینی بدون نیاز مکرر به حلال‌های گران‌قیمت رنگ‌بر.
خطیت عالی در روش برادفورد	همبستگی خطی دقیق در دامنه غلظتی میکروگرم برای رسم منحنی‌های استاندارد BSA.
حساسیت بالا در مقیاس نانوگرم	قابلیت ردیابی باندهای پروتئینی بسیار رقیق تا حد 8 الی 10 نانوگرم در ژل.
تطابق با طیف‌سنجی جرمی (MS-compatible)	امکان استخراج هضم تریپسینی پروتئین از ژل برای آنالیزهای پروتئومیکس بدون تخریب زنجیره.

سوالات متداول

تفاوت اصلی میان کوماسی G-250 و R-250 در چیست؟

حرف G نشان‌دهنده ته‌رنگ متمایل به سبز (Greenish) و R نشان‌دهنده متمایل به قرمز (Reddish) است؛ فرم G-250 به دلیل حساسیت و پاسخ طیفی در ساخت معرف برادفورد استفاده می‌شود.

چگونه معرف برادفورد را با پودر G-250 تهیه می‌کنند؟

پودر G-250 در اتانول حل شده، با اسید فسفوریک 85 درصد مخلوط گشته و سپس با آب مقطر رقیق و فیلتر می‌شود تا رنگ قهوه‌ای-قرمز شفاف حاصل گردد.

آیا رنگ‌آمیزی با G-250 برای پروتئین‌های متصل به غشا نیز مناسب است؟

بله، در الکتروفورز Blue Native PAGE برای نگهداری بار سطحی و جداسازی کمپلکس‌های غشایی دست‌نخورده کاربرد اختصاصی دارد.