مهارکننده PD 98059 کد P215 سیگما آلدریچ

 

مهارکننده PD 98059 با کد کاتالوگ P215 از کمپانی سیگما آلدریچ، یک بازدارنده نفوذپذیر، غیررقابتی و بسیار انتخابی برای کینازهای فعال‌کننده MAPK یعنی MEK1 و MEK2 است. این ماده شیمیایی به جای رقابت با ATP، به فرم غیرفعال آنزیم MEK متصل شده و از فعال‌سازی و فسفوریلاسیون آن توسط کینازهای بالادست نظیر Raf ممانعت به عمل می‌آورد. به این ترتیب، مسیر سیگنال‌دهی MEK-ERK کاملاً خاموش می‌شود. PD 98059 یکی از ارکان پایه‌ای در آزمایش‌های بیوشیمی برای تعیین دقیق نقش آبشار کینازی Ras-Raf-MEK-ERK در تکثیر سلولی، تحول بدخیم و مهاجرت توموری است.

کاربردها

عنوان کاربرد	توضیح
مهار اختصاصی آبشار MEK/ERK	مهار غیررقابتی فعال‌سازی آنزیم‌های MEK1 و MEK2 در مسیر ترارسانش پیام سلولی
مطالعات تکثیر و بقای سلولی	بررسی وابستگی رده‌های سلولی مختلف به مسیر میتوژنی ERK جهت تقسیم سلول
تمایز و رشد سلول‌های عصبی	ارزیابی نقش آبشار MAP کیناز در تمایز نورونی تحریک‌شده با فاکتورهای رشد مثل NGF
تحقیقات مقاومت دارویی سرطان	سنجش حساسیت سلول‌های سرطانی مقاوم به شیمی‌درمانی پس از مهار مسیر کینازی

ویژگی‌ها و مشخصات

ویژگی	مقدار
نام محصول	PD 98059
برند سازنده	Sigma-Aldrich
کد کاتالوگ	P215
شماره CAS	167869-21-8
فرمول شیمیایی	C16H13NO3
وزن مولکولی	267.28 گرم بر مول
حالت فیزیکی	پودر جامد به رنگ زرد روشن
حلالیت	محلول در DMSO (تا 25 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر)
شرایط نگهداری	دمای 2 تا 8 درجه سانتی‌گراد یا منفی 20، دور از تابش مستقیم نور

مزایا

عنوان مزیت	توضیح
مکانیسم عمل آلوستریک	مهار بدون رقابت با ATP، کاهش خطای تداخل با سایر پروتئین کینازهای حیاتی
اختصاصیت نسبت به MEK	عدم مهار مستقیم ERK یا سایر کینازهای خانواده‌های JNK، PKA، PKC
تسهیل غربالگری بیوشیمیایی	تعیین پاسخ سلولی خطی و قابل تفکیک در ارزیابی‌های وسترن بلات فسفو-ERK
خلوص سنتزی اثبات‌شده	خلوص بیش از 98 درصد با حداقل تغییرات بین بچ‌های تولیدی مختلف سیگما

سوالات متداول

آیا PD 98059 می‌تواند فرم از قبل فعال‌شده MEK را مهار کند؟

خیر، مکانیسم اثر این ماده جلوگیری از فعال‌شدن MEK غیرفعال است؛ از این رو برای فرم‌های موتاسیونی دائماً فعال MEK کارایی پایینی دارد.

غلظت مناسب برای مهار کامل فسفوریلاسیون ERK در سلول‌ها چقدر است؟

معمولاً غلظت‌های بین 10 تا 50 میکرومولار همراه با پیش‌تیمار 30 تا 60 دقیقه‌ای سلول‌ها پیش از اضافه کردن محرک میتوژن به کار گرفته می‌شود.

چگونه باید از این ماده محلول ذخیره تهیه نمود؟

پودر را در DMSO با گرید کشت سلولی حل کرده، با فیلتر سرسنگی استریل نموده و در حجم‌های کاری خرد تقسیم کرده و در منفی 20 درجه فریز نمایید.